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上海通蔚生物有限公司
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閱讀:254發布時間:2019-9-5
ELISA試劑盒進行洗刷工作時,主要選用以下兩種辦法。
流水沖刷式:用于小珠載體的洗刷,洗刷液僅為蒸餾水甚至可用自來水。洗刷時附接一特別設備,使小珠在流水沖擊下不斷地翻滾淋洗,持續沖刷2分鐘后,吸干液體,再用蒸餾水浸泡2分鐘,吸干即可。浸泡式猶如盆浴,流水沖刷式則比方淋浴,其洗刷效果更為*,且也簡練、快速。已有試驗標明,流水沖刷式相同也適用于微量滴定板的洗刷。洗刷時設法加大水流量或加大水壓,讓水流沖擊板孔外表,洗刷效果更佳。
浸泡式:吸干或甩干孔內反響液;
用洗刷液過洗一遍(將洗刷液注滿板孔后,即甩去);
浸泡,行將洗刷液注滿板孔,放置1-2分鐘,間歇搖晃,浸泡時刻不可隨意縮短;
吸干孔內液體。吸干應*,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干;
洗刷3-4次,或按說明規則。在間接法中如本底較高,可增加洗刷次數或延伸浸泡時刻。
ELISA試劑盒的設置規范曲線樣品的規范濃度規劃要有一個比較大的跨度,并且要能包括你所要檢測試驗樣品的濃度,即樣品的濃度要在規范曲線濃度規劃之內,包括上限和下限,而關于呈S型的規范曲線,盡量要使試驗樣品的濃度在中間斜度及陡段,即曲線簡直成直線的規劃內。
用倍比稀釋法制造規范曲線中的規范樣品濃度,這樣就可以確保規范樣品的濃度不會呈現較大的違反。
樣品的濃度等目標是根據規范曲線計算出來的,所以要把做規范曲線看作是比做正式試驗還要重要的一件事,否則后邊的試驗效果無從談起。
做出的規范曲線相關系數因試驗要求不同而有所改變,但一般來說,相關系數R至少要大于0.98,關于有些試驗,至少要0.99甚至是0.999。
檢測規范樣品時,應按濃度遞加次序進行,以削減高濃度對低濃度的影響,進步準確性。
規范曲線的樣品數一般為7個點,但至少要確保有5個點。
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