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ELISA試劑盒實驗時至關重要的進程

閱讀:411發(fā)布時間:2019-5-13

ELISA試劑盒是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗確診方法。雖然ELISA試劑盒的操作進程看似簡略,但沒做到位的話就會影響實驗的作用。

所以ELISA試劑盒實驗時至關重要的進程有: 

一,、重要的洗刷: 

不充分的洗刷會導致差異和高布景,然后帶來不抱負的實驗效果。假設未結(jié)合的資料殘留在微孔板中,那么它會增加布景噪音。有必要的話,可增加洗刷液中的鹽濃度,這會阻止非特異結(jié)合反應。假設布景過高,置疑洗刷不夠時,能夠檢驗增加洗刷次數(shù)。 

第二、要害的關閉: 

關閉液的作用是讓不相關的蛋白占有微孔板中潛在的結(jié)合位點。這就下降了可發(fā)生信號的抗體非特異結(jié)合的時機。假設布景過高,置疑關閉不充分,那么能夠檢驗運用更高濃度的關閉液,或恰當延伸關閉時刻。 

現(xiàn)在主要有兩種類型的關閉液:蛋白和非離子型去污劑。運用的類型須取決于多個要素,包含微孔板的表面試劑、吸附的抗原、抗體和檢測試劑。好的關閉液應下降非特異性結(jié)合,但它不應當與抗原、抗體或檢測試劑發(fā)生相互作用。 

第三、抗體濃度須優(yōu)化: 

假設試劑稍有不同,則或許需要優(yōu)化抗體的量。非特異的抗體結(jié)合會增加布景。為了防止這一點,切勿運用過多的一抗或二抗。 

第四、檢測試劑要適量: 

切勿運用過多的檢測試劑。假設濃度過高,或者未正確稀釋,則會導致高布景。也不要顯色過度,如有必要,優(yōu)化一下何時應參與停止液。 

只要保證每一步操作都做到位,才會呈現(xiàn)的實驗效果。所以ELISA實驗的每一步都很重要,不能夠漫不經(jīng)心。


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