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上海通蔚生物有限公司
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閱讀:440發布時間:2019-4-11
想要試驗成果自然少不了ELISA試劑盒操作條件,我司業務錢司理整理了一份關于ELISA試劑盒操作條件,快來看看吧。
ELISA試劑盒操作過程
ELISA試劑盒運用前,將所有試劑充沛混勻。不要使液體發作大量的泡沫,以免加樣時參與大量的氣泡,發作加樣上的過失。依據待測樣品數量加上標準品的數量決議所需的板條數。每個標準品和空白孔主張做復孔。每個樣品依據自己的數量來定,能運用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后參與50ul于反應孔內。
參與稀釋好后的標準品50ul于反應孔、參與待測樣品50ul于反應孔內。立即參與50ul的*符號的抗體。蓋上膜板,悄悄振蕩混勻,37℃溫育1小時。
甩去孔內液體,每孔加滿洗刷液,振蕩30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數添加一次。
每孔參與80ul的親和鏈酶素-HRP,悄悄振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
甩去孔內液體,每孔加滿洗刷液,振蕩30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。ELISA試劑盒重復此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數添加一次。
每孔參與底物A、B各50ul,悄悄振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。防止光照。
取出酶標板,敏捷參與50ul停止液,參與停止液后應立即測定成果。
在450nm波利益測定各孔的OD值。
依據ELISA試劑盒試劑的來歷和標本的性狀以及檢測的具備條件,可規劃出各種不同類型的檢測方法。
(一)雙抗體夾心法
(二)雙位點一步法
(三)間接法測抗體
(四)競爭法
(五)捕獲法測IgM抗體
(六)使用親和素和*
ELISA試劑盒廣泛用作非放射性同位素的成鍵化驗. 在這種方法中, 一般標準配體是固定的, 經過參與溶液相受體或蛋白質來使之成鍵. ELISA試劑盒經過參與與受體特異性反應的抗體來定量成鍵的受體, 而且*初抗體的量以參與第二種能顯色的抗體丈量. 第二種抗體能識別抗體的結尾, 在其結尾的堿性磷酸酯或過氧化物酶等與酶發作反應, 從而使溶液顯色.
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