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上海博湖生物科技有限公司

主營(yíng)產(chǎn)品: 高密度脂蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒,同型半胱氨酸ELISA檢測(cè)試劑盒,游離脂肪酸ELISA檢測(cè)試劑盒

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http://www.kindlingtouch.com/st597308/
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Bst 4.0 Basic Mix (液體預(yù)混)
Bst 4.0 Basic Mix (液體預(yù)混)
參考價(jià)2574
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
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    上海市

規(guī)格
100Tx20μl2574元15 盒 可售

更新時(shí)間:2024-12-06 16:17:49瀏覽次數(shù):660

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【簡(jiǎn)單介紹】
貨號(hào) P-PR1245
Bst 4.0 Basic Mix (液體預(yù)混)儲(chǔ)存:長(zhǎng)期保存制品于-20℃,保存 2 年。

公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!

商品屬性

貨號(hào)

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

P-PR1245

Bst 4.0 Basic Mix (液體預(yù)混)

100Tx20μl

該制品為單一組分的 MasterMix(2 倍濃度),包含了反應(yīng)緩沖液、Mg2+、dNTP、Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶等,使用時(shí)只需要加入引物、模板即可進(jìn)行核酸恒溫?cái)U(kuò)增。Bst4.0 DNA/RNA 聚合酶具有依賴于 RNA 模板的聚合酶活性(逆轉(zhuǎn)錄),還具有依賴于 DNA 的聚合酶活性,因此無(wú)論DNA 或 RNA 樣本均可使用該制品進(jìn)行高效的恒溫?cái)U(kuò)增。該制品是進(jìn)行 LAMP 及 RT-LAMP 擴(kuò)增反應(yīng)的試劑。優(yōu)化的反應(yīng)體系,確保快速的完成檢測(cè)試劑的反應(yīng)體系建立。該系列產(chǎn)品不包含任何其它輔助染料,在 LAMP 的擴(kuò)增搭配 OG 橙綠變色管進(jìn)行可視化變色反應(yīng)。除此外,該制品還可以用于其它恒溫?cái)U(kuò)增實(shí)驗(yàn),包括 CPA、SMAP 等。
儲(chǔ)存:長(zhǎng)期保存制品于-20℃,保存 2 年。
使用實(shí)例(以 LAMP OG 橙綠變色為例)橙綠變色染料(OG Dye)以凍干的形式預(yù)加在 8 聯(lián)管蓋上。在 LAMP 反應(yīng)完畢后(在反應(yīng)完畢前,務(wù)
必不能將管蓋上染料混入反應(yīng)液中),將 0.2ml EP 管顛倒溶解 OG 染料后。LAMP 的反應(yīng)產(chǎn)物將與 OG 染料形成強(qiáng)烈的綠色肉眼可見(jiàn)變色反應(yīng)(陽(yáng)性),而未發(fā)生擴(kuò)增的 EP管為深橙色(陰性)。
(1)配制反應(yīng)體系
在 0.2ml EP 反應(yīng)管中加入下述試劑
2xBst 4.0 Basic Mix 10 μl
*10xLAMP Primer Mix 2 μl
模板 DNA/RNA X μl
ddH2O 到總體積 20 μl
*10xLAMP Primer Mix 濃度:FIP/BIP 分別為 16 μM、LoopF/B 分別為 4 μM、F3/B3 分別為 2 μM全部試劑加入完畢后,輕彈 EP 管底部后,再蓋上 OG 橙綠變色管(蓋上管蓋后務(wù)必不能再劇烈混合與倒置,以防止將管蓋上的 OG 染料溶解,OG 染料一旦混入反應(yīng)液中將會(huì)終止 LAMP 反應(yīng))。
實(shí)驗(yàn) LAMP Primer Mix 分別采用 1、1.5、2 μl,以陰性不變色,陽(yáng)性樣品正常變色為標(biāo)準(zhǔn),作為后續(xù)測(cè)試用量。
(2)反應(yīng)體系配好后,置于 60~68°C(實(shí)驗(yàn)采用65°C)進(jìn)行反應(yīng) 20~45min。(擴(kuò)增良好的引物組合,通常 25min 即可變色,一般不超過(guò) 45min,實(shí)驗(yàn)設(shè)置20、25、30、45min)。
(3)觀察結(jié)果:觀察結(jié)果時(shí),盡可能不要與配制反應(yīng)空間共用,以防止污染操作臺(tái)。將反應(yīng) EP 管倒置,并手腕輕甩,反應(yīng)液浸泡 EP 管蓋上的 OG 染料,靜置 30s。再將 EP 反應(yīng)管正置,并輕甩反應(yīng)液到 EP 管底部,此時(shí)擴(kuò)增樣品將變?yōu)轷r艷肉眼可見(jiàn)綠色,而陰性未發(fā)生擴(kuò)增的管將為深橙色。
注意事項(xiàng)
1. 在用于其它恒溫?cái)U(kuò)增反應(yīng)時(shí)(如 CPA、SMAP 等),可參考如上策略進(jìn)行使用,反應(yīng)時(shí)間可能會(huì)需要調(diào)整。
2. 關(guān)于礦物油的使用,在配制完 LAMP 反應(yīng)體系后,可加入一滴礦物油覆蓋于反應(yīng)液上部,以減少氣溶膠的污染。
3. 鑒于特殊的生產(chǎn)工藝, 全系恒溫?cái)U(kuò)增 Mix 系
列均不能進(jìn)行濁度分析。

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