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干擾ELISA酶聯免疫吸附實驗結果的因素有哪些?

2024-8-26  閱讀(338)

  ELISA酶聯免疫吸附實驗原理:免疫分析是一種利用特定抗體與抗原或半抗原發生的高選擇性高特異性識別和結合原理,對待測抗體或者抗原進行分析測定的方法,酶聯免疫吸附分析(下稱ELISA)是免疫分析的一種,分三個部分組成:免疫識別,信號輸出和數據處理。
 
  影響酶聯免疫吸附試驗ELISA結果的因素有哪些?
 
  主要包括檢測板、包被緩沖液、捕獲抗體、封閉緩沖液、靶抗原、檢測抗體、酶偶聯物、洗滌液、底物、信號檢測的質量和完整性都會干擾正確的 ELISA 測試。一些可能干擾測試的因素如下:
 
  1. 微孔板:孔的形狀和質量、板的材料、潛在的預激活、均勻或不均勻的涂層
 
  2.緩沖液:pH、污染
 
  3.捕獲和檢測抗體:孵育時間、溫度、特異性、滴度、親和力
 
  4.封閉緩沖液:交叉反應、濃度、污染
 
  5.靶抗原:構象、穩定性、表位
 
  6.酶結合物:類型、濃度、功能、交叉反應
 
  7.清洗:污染、頻率、體積、持續時間、成分
 
  8.基板:微孔板的質量、材質
 
  9.檢測:檢測相關的儀器設備:比如:分光光度計、讀板機等相關因素
 
  10. 誤差:人為誤差(實驗步驟不規范等)
 


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