 |
上海博湖生物科技有限公司
主營產品： 高密度脂蛋白ELISA檢測試劑盒,同型半胱氨酸ELISA檢測試劑盒,游離脂肪酸ELISA檢測試劑盒 |
8
聯系電話
18117197628
公司信息
- 聯系人：
- 陳經理
- 電話：
- 021-57763112
- 手機：
- 18117197628
- 售后電話：
- 18117197628
- 傳真：
- 86-021-57690166
- 地址：
- 上海閔行區碧泉路36弄銀宵大廈B102
- 郵編：
- 200000
- 個性化：
- www.shbhbio-e.com
PCR出現非特異性擴增帶原因與對策
2023-6-12 閱讀(1046)
PCR擴增后出現的條帶與預計的大小不一致，或大或小，或者同時出現特異性擴增帶 與非特異性擴增帶。非特異性條帶的出現，其原因：
1、引物與靶序列不wan全互補、或引物聚合形成二聚體。
2、Mg2+離子濃度過高、退火溫度過低，及PCR循環次數過多有關。其次，是酶的質和量，往往一些來源的酶易出現非特異條帶而另一來源的酶則不出現，酶的量過多有時也會出現非特異性擴增。
其對策有：
①必要時，重新設計引物。
②減低酶的量或調換另一來源的酶。
③降低引物量，適當增加模板量，減少循環次數。
④適當提高退火溫度或采用二溫度點法(93℃變性，65℃左右退火與延伸，也叫兩步法)。
