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上海博湖生物科技有限公司
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單克隆抗體的制備與應(yīng)用
2023-5-23 閱讀(503)
概念：由單個(gè)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無(wú)性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。
特點(diǎn)：化學(xué)性質(zhì)單一，特異性強(qiáng)，靈敏度高。
一、單抗的制備過(guò)程：
1.動(dòng)物免疫：注射特定抗原蛋白
2.分離脾淋巴細(xì)胞：與培養(yǎng)好的骨髓瘤細(xì)胞混合，人工誘導(dǎo)細(xì)胞融合。
3.細(xì)胞融合：淋巴細(xì)胞雜交瘤的制備
4.雜交瘤細(xì)胞的篩選：HAT選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞。（含次黃嘌ling （H）、氨基喋呤（A）及胸腺嘧啶核苷（T）的一種培養(yǎng)基，其中三種成分與細(xì)胞DNA合成有關(guān)，骨髓瘤細(xì)胞遺傳缺陷型，不能利用，被淘汰）
5.培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞：體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞，從培養(yǎng)液中分離提取單克隆抗體。或者，將雜交瘤細(xì)胞移植到小鼠腹腔內(nèi)，從小鼠腹水中分離提取單克隆抗體。
6.單克隆抗體的制備和凍存、純化。
二、單克隆抗體的應(yīng)用：
1、診斷疾病：診斷病毒引起的疾病和用癌細(xì)胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
2、藥物導(dǎo)向治療：運(yùn)用藥物與單克隆抗體連接在一起制成“生物導(dǎo)"
3、分離和純化抗原分子。
