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上海聯邁生物工程有限公司
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抗干擾TaqDNA 聚合酶本產品是截短后的 Taq DNA 聚合酶，它缺失了N端的280個氨基酸。本產品還有其它突變，這些突變使它能夠耐受全血中存在的抑制劑。此酶能夠擴增人和小鼠全血樣品中的 DNA 而無需事先提純。本產品在 25 µl 的反應體系中能夠耐受高達 10% 的全血 （50 µl 反應體系中耐受 20%） 。其具體有下列特點：
抗干擾TaqDNA 聚合酶
名稱 | 規格 | 價格 | 手冊 |
抗干擾TaqDNA 聚合酶 | 100U | 詢價 |
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本產品是截短后的 Taq DNA 聚合酶，它缺失了N端的280個氨基酸。本產品還有其它突變，這些突變使它能夠耐受全血中存在的抑制劑。此酶能夠擴增人和小鼠全血樣品中的 DNA 而無需事先提純。本產品在 25 µl 的反應體系中能夠耐受高達 10% 的全血 (50 µl 反應體系中耐受 20%) 。其具體有下列特點：
1. 無需對 DNA 提純
2. 聚合能力強
3. 適合診斷用 PCR
4. 在大多數抗凝劑存在下依然表現良好，包括肝素，檸檬酸和 EDTA
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質分離，并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進入水相，離心后可形成水相層和有機層，這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質。
實驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環狀的兩條互補鏈不會*分離，當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調節其pH至中性時，變性的質粒DNA又恢復原來的構型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復性而形成纏連的網狀結構，通過離心，染色體DNA與不穩定的大分子RNA、蛋白質-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
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