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上海聯邁生物工程有限公司
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AFLP試劑盒（EcoRI-MseI）AFLP（amplified fragment length polymorphism）原理是一種結合RFLP和PCR技術特點的、迄今為止較有效分子標記分型技術，本產品在傳統AFLP-PCR的基礎上經過精心優化而開發，它具有下列特點：
1. 一站式，足夠50次酶切-連接反應、50次預擴反應和1600次AFLP PCR（PCR按30 uL體系計算），但不包括DN
AFLP試劑盒（EcoRI-MseI）
名稱 | 規格 | 價格 | 手冊 |
AFLP試劑盒（EcoRI-MseI） | 1600次 | 詢價 |
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AFLP（amplified fragment length polymorphism）原理是一種結合RFLP和PCR技術特點的、迄今為止有效分子標記分型技術，本產品在傳統AFLP-PCR的基礎上經過精心優化而開發，它具有下列特點：
1. 一站式，足夠50次酶切-連接反應、50次預擴反應和1600次AFLP PCR（PCR按30 uL體系計算），但不包括DNA純化和帶型分析試劑（如PAGE電泳試劑和銀染試劑）。
2. 本系列產品提供EcoRI-MseI組合，適用于GC含量在50%以上的基因組。對GC含量在50%以下的基因組，需要另購AFLP（EcoRI-TaqI）組合。
3. 各種參數都經過優化，一次PCR所得AFLP片段數一般在10-100之間，可重復性好，誤差小于0.6%。
4. 本產品適用于基因組在500 Mb-6000 Mb的材料（如動物和植物），對于基因組在50-500 Mb的材料（如細菌和真菌）或50Mb以下的材料（如質粒，cosmid，BAC，YAC和PAC等），需要分別另購專門的+1型預擴引物混合液和+3型EcoRI引物（8種）AFLP引物對。
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質分離，并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進入水相，離心后可形成水相層和有機層，這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質。
實驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環狀的兩條互補鏈不會*分離，當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調節其pH至中性時，變性的質粒DNA又恢復原來的構型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復性而形成纏連的網狀結構，通過離心，染色體DNA與不穩定的大分子RNA、蛋白質-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
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