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上海聯邁生物工程有限公司
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Rosetta-gamiB（DE3）plysS大腸桿菌Rosetta-gami B（DE3）系列菌株來源于Origami B系列菌株，攜帶有TrxB和Gor基因突變，集合了BL21系列，Rosetta系列菌株和Origami系列菌株的優點，極大增強了細胞內二硫鍵的形成和含有在大腸桿菌中稀有密碼子的真核細胞蛋白的表達能力。
Rosetta-gami B（DE3）plysS來源于Rosetta-gam
Rosetta-gamiB(DE3)plysS大腸桿菌
名稱 | 規格 | 價格 | 手冊 |
Rosetta-gamiB(DE3)plysS大腸桿菌 | 1 管 | 詢價 |
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Rosetta-gami B(DE3)系列菌株來源于Origami B系列菌株，攜帶有TrxB和Gor基因突變，集合了BL21系列，Rosetta系列菌株和Origami系列菌株的優點，極大增強了細胞內二硫鍵的形成和含有在大腸桿菌中稀有密碼子的真核Rosetta-gamiB(DE3)plysS大腸桿菌細胞蛋白的表達能力。
Rosetta-gami B(DE3)plysS來源于Rosetta-gami B(DE3)菌株，含有pRARE質粒，包含稀有密碼子；含有BL21系列菌株中的lacZY基因突變，能夠通過IPTG高效控制目的基因的表達；含有溶源性的 λDE3，帶有T7 RNA聚合酶的染色體拷貝；含有pLySs質粒，能夠產生T7溶菌酶，可以有效降低目的基因的基礎表達水平。pLySs質粒能夠和pUC-及pBR322-衍生的質粒互相共存。
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質分離，并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進入水相，Rosetta-gamiB(DE3)plysS大腸桿菌離心后可形成水相層和有機層，這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質。
實驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環狀的兩條互補鏈不會*分離，當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調節其pH至中性時，變性的質粒DNA又恢復原來的構型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復性而形成纏連的網狀結構，通過離心，染色體DNA與不穩定的大分子RNA、蛋白質-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
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