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上海聯(lián)邁生物工程有限公司
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更新時(shí)間:2018-06-14 15:34:58瀏覽次數(shù):240次
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Rosetta(DE3)plysS大腸桿菌Rosetta系列菌株來源于BL21系列宿主菌,該系列菌株含有原本在大腸桿菌中稀少的真核細(xì)胞密碼子,增加了真核細(xì)胞的蛋白表達(dá)水平。
Rosetta(DE3)plysS菌株來源于Rosetta (DE3),含有pRARE質(zhì)粒,能夠提供稀有密碼子的tRNA,該質(zhì)粒具有氯霉素抗性;菌株含有的DE3是溶源性的 λDE3,帶有T7 RNA聚合酶的染色體拷貝;含有的p
Rosetta(DE3)plysS大腸桿菌
名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格 | 手冊(cè) |
Orgami(DE3)大腸桿菌 | 1 管 | 詢價(jià) |
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Rosetta系列菌株來源于BL21系列宿主菌,該系列菌株含有原本在大腸桿菌中稀少的真核細(xì)胞密碼子,增加了真核細(xì)胞的蛋白表達(dá)水平。
Rosetta(DE3)plysS菌株來源于RRosetta(DE3)plysS大腸桿菌osetta (DE3),含有pRARE質(zhì)粒,能夠提供稀有密碼子的tRNA,該質(zhì)粒具有氯霉素抗性;菌株含有的DE3是溶源性的 λDE3,帶有T7 RNA聚合酶的染色體拷貝;含有的pLSs質(zhì)粒能夠產(chǎn)生T7溶菌酶,可以有效降低目的基因的基礎(chǔ)表達(dá)水平。pLySs質(zhì)粒具有氯霉素抗性。pLySs質(zhì)粒的起始復(fù)制位點(diǎn)是p15 Origin,使得該質(zhì)粒能夠和pUC-及pBR322-衍生的質(zhì)粒互相共存。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質(zhì)分離,并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時(shí),它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相,Rosetta(DE3)plysS大腸桿菌離心后可形成水相層和有機(jī)層,這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測(cè)定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價(jià)閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會(huì)*分離,當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時(shí),變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),通過離心,染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
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PRMI1640培養(yǎng)基(含10%胎牛血清)
成骨細(xì)胞生長因子
成纖維細(xì)胞生長因子
成纖維細(xì)胞生長因子-2
成纖維細(xì)胞生長因子-不含動(dòng)物成分
動(dòng)物上皮細(xì)胞生長因子
肝細(xì)胞生長因子
骨骼肌細(xì)胞生長因子
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黑色素細(xì)胞生長因子-不含TPA
滑膜細(xì)胞生長因子
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間充質(zhì)干細(xì)胞軟骨細(xì)胞分化生長因子
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主營產(chǎn)品:ELISA試劑盒,重組蛋白,抗體 ,細(xì)胞株,原代細(xì)胞,生化試劑,實(shí)驗(yàn)耗材,進(jìn)口品牌代購等科研產(chǎn)品
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