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上海聯邁生物工程有限公司
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TdT加尾法DNA標記試劑盒本產品是基于TdT末端轉移酶能夠在DNA 的3端添加dNTP尾巴的原理設計,本產品在上述原理的基礎上本產品的特點是:
1. 快速,10分鐘即可完成標記反應。
2. 尤其適合于標記Oligo探針。
TdT加尾法DNA標記試劑盒
名稱 | 規格 | 價格 | 手冊 |
TdT加尾法DNA標記試劑盒 | 5次 | 詢價 |
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本產品是基于TdT末端轉移酶能夠在DNA 的3端添加dNTP尾巴的原理設計,本產品在上述原理的基礎上本產品的特點是:
1. 快速,10分鐘即可完成標記反應。
2. 尤其適合于標記Oligo探針。
3. 能在每個分子的末端標記5-10個左右的標記物。
4. 可用于各種同位素標記和其他任何非同位素標記(80918A,但需自備標記底物,底物包括fluorescein-dUTP、hydroxycoumarin-dUTP、resorufin-dUTP和aminoallyl-dUTP)、其中80918B和80918C可直接用于生物素和地標記,不需自備標記底物。
5. 通過摻入非標記核苷酸以控制標記的密度,減少空間阻礙,增加靈敏度。
6. 可以用于Southern 和Northern Blot、原位雜交、菌落和斑點印跡雜交等分析。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質分離,并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進入水相,離心后可形成水相層和有機層,這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質。
實驗步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價閉合環狀的兩條互補鏈不會*分離,當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調節其pH至中性時,變性的質粒DNA又恢復原來的構型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復性而形成纏連的網狀結構,通過離心,染色體DNA與不穩定的大分子RNA、蛋白質-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
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