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一站式DNA非變性PAGE電泳套裝非變性PAGE電泳是研究SSCP-PCR(single-strand conformation polymorphism-PCR、單鏈PCR片段構象多態性)和凝膠滯阻(Gel Shift)的重要研究手段,因為在非變性PAGE中, DNA的遷移率除跟長短相關外,還跟其構象和結合的蛋白質相關。本產品就是專門用于非變性PAGE的試劑,它具有下列特點:
1. 一站式,用戶
一站式DNA非變性PAGE電泳套裝
名稱 | 規格 | 價格 | 手冊 |
一站式DNA非變性PAGE電泳套裝 | 30次 | 1190元 |
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非變性PAGE電泳是研究SSCP-PCR(single-strand conformation polymorphism-PCR、單鏈PCR片段構象多態性)和凝膠滯阻(Gel Shift)的重要研究手段,因為在非變性PAGE中, DNA的遷移率除跟長短相關外,還跟其構象和結合的蛋白質相關。本產品就是專門用于非變性PAGE的試劑,它具有下列特點:
1. 一站式,用戶只需要準備水和樣品,十分方便。
2. 安全,免去了實驗人員接觸粉末狀的劇毒物品丙烯酰胺。
3. 靈活,高濃度的丙烯酰胺溶液可用于配制各種濃度的PAGE膠,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺可用于配制各種交聯度的PAGE膠。
4. PAGE電泳后可直接用于銀染等后續試驗。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質分離,并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進入水相,離心后可形成水相層和有機層,這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質。
實驗步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價閉合環狀的兩條互補鏈不會*分離,當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調節其pH至中性時,變性的質粒DNA又恢復原來的構型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復性而形成纏連的網狀結構,通過離心,染色體DNA與不穩定的大分子RNA、蛋白質-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
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