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上海聯邁生物工程有限公司
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大提柱式DNA清除劑本產品是的柱式DNA清除劑(CAT#:90318)的大提升級產品,可用于細胞總RNA樣品中基因組DNA污染的去除。目前較常用的RNase-free DNase處理方法因DNase中所含殘留的RNase能破壞RNA完整性而具有很大缺陷。本公司開發的大提柱式非酶DNA清除劑不但*避免了RNase-free DNase的這一缺陷,同時還具有下列特點。
1. 處理量大,一次可以處理高
大提柱式DNA清除劑
名稱 | 規格 | 價格 | 手冊 |
大提柱式DNA清除劑 | 5次 | 詢價 |
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本產品是的柱式DNA清除劑(CAT#:90318)的大提升級產品,可用于細胞總RNA樣品中基因組DNA污染的去除。目前zui常用的RNase-free DNase處理方法因DNase中所含殘留的RNase能破壞RNA完整性而具有很大缺陷。本公司開發的大提柱式非酶DNA清除劑不但*避免了RNase-free DNase的這一缺陷,同時還具有下列特點。
1. 處理量大,一次可以處理高達400 μg的總RNA。
2. 操作簡單快速,全部操作只需要十余分鐘。
3. 回收率高達80%以上。
4. 高效,能使總RNA中的基因組DNA污染降低到電泳檢測不到的水平,而RNA分子完整性不受任何影響。
5. 本身不含RNase污染,避免了用DNase處理的zui大問題。
6. 穩定,本產品為非酶產品,可以常溫運輸和4℃長期保存;而RNase-free DNase的運輸和長期保存必須在低溫進行。
7. 性價比高,單位成本遠低于RNase-free DNase。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質分離,并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進入水相,離心后可形成水相層和有機層,這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質。
實驗步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價閉合環狀的兩條互補鏈不會*分離,當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調節其pH至中性時,變性的質粒DNA又恢復原來的構型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復性而形成纏連的網狀結構,通過離心,染色體DNA與不穩定的大分子RNA、蛋白質-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
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