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RNase抑制劑(小鼠源)

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更新時間:2018-06-08 15:40:18瀏覽次數:333次

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產品簡介

RNase抑制劑(小鼠源)本RNase 抑制劑是鼠源重組蛋白,分子量為 50 kDa,可以特異性抑制 RNase A、B 和 C 活性。它與 RNase 以 1:1 的比例高效非共價結合從而抑制其活性。但對 RNase 1、RNase T1、S1 核酸酶、RNaseH 或來源于曲霉屬的 RNase 無效。此外,與下列聚合酶共同使用時,該抑制劑不會抑制聚合酶的活性,如:Taq DNA 聚合酶、AMV

詳細介紹

 

RNase抑制劑(小鼠源)

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RNase抑制劑(小鼠源)

3000U

990元

 

本RNase 抑制劑是鼠源重組蛋白,分子量為 50 kDa,可以特異性抑制 RNase A、B 和 C 活性。它與 RNase 以 1:1 的比例高效非共價結合從而抑制其活性。但對 RNase 1、RNase T1、S1 核酸酶、RNaseH 或來源于曲霉屬的 RNase 無效。此外,與下列聚合酶共同使用時,該抑制劑不會抑制聚合酶的活性,如:Taq DNA 聚合酶、AMV 或 M-MuLV 反轉錄酶或噬菌體 RNA 聚合酶 (SP6、T7 或 T3) 。
重組小鼠 RNase 抑制劑不含有半胱氨酸,已證實,人源中的半胱氨酸能導致抑制劑對氧化敏感甚至失活。因此,小鼠 RNase 抑制劑與人/豬 RNase 抑制劑相比,抗氧化能力顯著提高,且在 DTT 濃度較低 (< 1 mM)  時更穩定。這使其在不適宜高濃度 DTT的反應中更具優勢,如實時 RT-PCR。
本產品具有下列特點:
1.  抑制常見真核 RNase
2.  與 Taq 聚合酶、AMV 或 M-MuLV 反轉錄酶兼容
3.  在較寬的 pH 范圍內均有活性 (pH 5-8)
4.  cDNA 合成和 RT-PCR
5.   體外轉錄/翻譯
6.   酶催化的 RNA 標記反應
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質分離,并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進入水相,離心后可形成水相層和有機層,這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質。
實驗步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價閉合環狀的兩條互補鏈不會*分離,當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調節其pH至中性時,變性的質粒DNA又恢復原來的構型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復性而形成纏連的網狀結構,通過離心,染色體DNA與不穩定的大分子RNA、蛋白質-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
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