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上海聯邁生物工程有限公司
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植物RNA提取高鹽溶液植物RNA溶液中常富含多糖、多酚,會阻礙和影響后續實驗。本產品主要用于 去除植物RNA溶液中的多糖、多酚。向已經提取的植物RNA溶液中或在使用植物 RNAout(產品編號:3080)提取植物RNA過程中加入本產品,再經過異丙醇沉淀, 可以達到去除多糖、多酚的目的,得到高純度的RNA。本產品具有下列特點:
1. 本產品不含DNase和RNase。
植物RNA提取高鹽溶液
名稱 | 規格 | 價格 | 手冊 |
植物RNA提取高鹽溶液 | 100ML | 390元 |
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植物RNA溶液中常富含多糖、多酚,會阻礙和影響后續實驗。本產品主要用于 去除植物RNA溶液中的多糖、多酚。向已經提取的植物RNA溶液中或在使用植物 RNAout(產品編號:3080)提取植物RNA過程中加入本產品,再經過異丙醇沉淀, 可以達到去除多糖、多酚的目的,得到高純度的RNA。本產品具有下列特點:
1. 本產品不含DNase和RNase。
2. 經本產品處理后的RNA純度高,可以直接用于Northern雜交、斑點雜交、體外 翻譯、RNA分解酶的保護分析、RT-PCR、構建cDNA文庫等各種分子生物學實 驗。
3. 本產品不能用于小分子量RNA中多糖、多酚的去除,會嚴重影響小分子量RNA的 回收率。
4. 在處理微量RNA樣品時,在去除多糖、多酚的同時,RNA損耗也較大,此時可以 添加產品微量核酸沉淀劑(CAT:50903)以提高回收率。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質分離,并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進入水相,離心后可形成水相層和有機層,這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質。
實驗步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價閉合環狀的兩條互補鏈不會*分離,當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調節其pH至中性時,變性的質粒DNA又恢復原來的構型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復性而形成纏連的網狀結構,通過離心,染色體DNA與不穩定的大分子RNA、蛋白質-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
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