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上海聯邁生物工程有限公司
胚胎肝間質細胞永生化是來源于早期中胚層的一類多能干細胞, 在體內具有分布廣泛, 體外能夠大量擴增和免疫原性低等特點, 是一種細胞治療的理想種子細胞。自20世紀60年代,Friedenstein等發現在人骨髓長期培養中, 存在一種形態類似成纖維細胞的貼壁生長的細胞且移植到小鼠體內具有成骨能力和造血支持作用,
胚胎肝間質細胞永生化
產品規格:>5×105細胞數
產品價格:3750
包裝規格:1ml凍存細胞懸液或T-25培養瓶
英文名稱: Duck Embryo Liver Interstitial Cells
胚胎肝間質細胞永生化詳述:
間充質干細胞(Mesenchymal stem cells, MSCs)是來源于早期中胚層的一類多能干細胞, 在體內具有分布廣泛, 體外能夠大量擴增和免疫原性低等特點, 是一種細胞治療的理想種子細胞。自20世紀60年代,Friedenstein等發現在人骨髓長期培養中, 存在一種形態類似成纖維細胞的貼壁生長的細胞且移植到小鼠體內具有成骨能力和造血支持作用, 將這種細胞命名為骨髓基質細胞(Bone marrow stromal cells, BMSCs)。到20世紀90年代末, 人們才成功分離一種具有成骨、成軟骨和成脂肪能力的細胞, 稱之為間充質干細胞(Mesenchymal stem cells, MSCs)。
隨后研究者也從其他組織, 如脂肪、臍帶、胎盤、肝臟、骨實質和肌肉等中成功分離獲得間充質干細胞。作為一類成體干細胞中的間充質干細胞, 目前大部分的研究集中在人及大鼠、小鼠這兩種模式動物上, 其他動物的間充質干細胞報道相對較少。選取中國*家禽品種鴨子為實驗材料, 以鴨胚胎肝臟中的間充質干細胞為研究對象, 對其進行分離培養鑒定, 進行增殖能力檢測及分化能力鑒定, 為家禽干細胞研究及畜禽遺傳資源保存提供借鑒及參考。鴨胚胎肝間質細胞進行慢病毒轉染8-12h,連續傳13代,采用高濃度含嘌呤霉素培養基(4μg/mL)培養,篩選陽性克隆;篩選出陽性永生化鴨胚胎肝間質細胞。
特性:
1) 來源:上海中科院動物研究所
2) 含量:>5x105個/mL
3) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
4) 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
產品的運輸和保存:
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。1) 1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2) T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
推薦培養基:
我們推薦使用原代間質細胞培養體系作為體外培養原代肝間質細胞永生化的培養基。
產品使用:
1) 本產品僅能用于科研
2) 本產品未通過直接用于活體動物和人的審核
3) 本產品未通過用于活體診斷的審核
原代細胞分離:
一、細胞培養
1取材 在無菌環境下從機體取出某種組織細胞(視實驗目的而定),經過一定的處理(如消化分散細胞、分離等)后接入培養器血中,這一過程稱為取材。如是細胞株的擴大培養則無取材這一過程。機體取出的組織細胞的*培養稱為原代培養。2培養 將取得的組織細胞接入培養瓶或培養板中的過程稱為培養。3凍存及復蘇(可參閱后面有關章節)為了保存細胞,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存。凍存的溫度一般用液氮的溫度-196℃,將細胞收集至凍存管中加入含保護劑(一般為二甲亞砜或甘油)的培養基,以一定的冷卻速度凍存,終保存于液氮中。在極低的溫度下,細胞保存的時間幾乎是無限的。復蘇一般采用快融方法,即從液氮中取出凍存管后,立即放入37℃水中,使之在一分鐘內迅速融解。然后將細胞轉入培養器皿中進行培養。
二、原代細胞分離
凡是來源于胚胎、組織器官及外周血,經特殊分離方法制備而來的原初培養的細胞稱之為原代細胞。1懸浮細胞的分離方法組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據需要收獲目的細胞。2實體組織材料的分離方法對于實體組織材料,由于細胞間結合緊密,為了使組織中的細胞充分分散,形成細胞懸液,可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。
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