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NR8383大鼠肺泡巨噬細胞(STR鑒定)

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更新時間:2018-05-25 14:59:23瀏覽次數:232次

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產品簡介

NR8383大鼠肺泡巨噬細胞(STR鑒定)NR8383 (正常大鼠,1983年)來源于肺灌洗時的正常大鼠肺泡巨噬細胞。細胞在gerbil肺細胞連續培養液存在下培養了大約8-9個月。隨后,不再需要外源生長因子。通過有限稀釋法從單個細胞克隆并亞克隆NR8383細胞,并三次用軟瓊脂亞克隆。細胞表現出巨噬細胞的特性,吞噬酵母多糖和銅綠,
英文名稱:Rat Alveolar Macrophages Cell

詳細介紹

NR8383大鼠肺泡巨噬細胞(STR鑒定)
英文名稱:Rat Alveolar Macrophages Cell
規格:1*10 6  
細胞介紹
NR8383 (正常大鼠,1983年)來源于肺灌洗時的正常大鼠肺泡巨噬細胞。細胞在gerbil肺細胞連續培養液存在下培養了大約8-9個月。隨后,不再需要外源生長因子。通過有限稀釋法從單個細胞克隆并亞克隆NR8383細胞,并三次用軟瓊脂亞克隆。細胞表現出巨噬細胞的特性,吞噬酵母多糖和銅綠,非特異性脂酶活性,Fc受體,氧化降解;分泌IL-1, TGF-β和IL-6,可重復地響應外源生長因子。NR8383細胞響應博萊霉素,分泌TGF-β前體。在博萊霉素刺激下,TGF –β mRNA表達也上升。細胞對內毒素敏感。1-10 鈉克/毫升的LPS水平抑制增生達50%。 即使達到0.001毫克/毫升的水平,LPS抑制還是無毒且在后續過程中可逆的。NR8383細胞株提供了高響應的肺泡巨噬細胞的均一來源,可以用于體外研究巨響細胞相關活性。
一、細胞特性
1) 來源:肺;巨噬細胞 
2) 形態:巨噬細胞,半懸浮生長
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
二、細胞收到后處理
NR8383大鼠肺泡巨噬細胞(STR鑒定)
在培養瓶中培養至良好狀態后灌滿*培養液并封好瓶口是細胞運輸的辦法。收到細胞回到自己的實驗室后,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內,嚴格無菌操作。鏡下觀察:未超過80%匯合度時,可將瓶裝的*培養液移入廢液缸中,原瓶(T25瓶)保留6-8ml*培養液,懸浮細胞需離心處理,放入37℃、5%CO2孵箱培養;超過80%匯合度時,根據情況傳代或者凍存,具體操作見細胞培養步驟。
三、細胞培養步驟
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入6cm皿中,加入約6ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
2、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集,1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,進行離心收集,1000RPM條件下離心5分鐘,去除上清,按凍存數量加入血清及DMSO,凍存比例為90%FBS+10%DMSO。
出現問題,可重發的情況有哪些?判定標準是什么?
(1)細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、破損、漏液等,重發;

  1. 凍存的細胞復蘇后,絕大多數細胞未存活,重發;
  2. 存活的細胞靜置24小時后,絕大多數細胞未存活,重發;
  3. 凍存的細胞復蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封,出現污染,重發;
  4. 視具體情況而定。

 ★ 注:如運輸過程中導致細胞污染或者死亡,我們將無條件補發 收貨后十個工作日內有其他問題提供照片可半價重發。

相關細胞系列表:

MEM*培養液,550ml/瓶適用于培養Hela,WI-38,MS751,Daoy,8305C,C3H/10T1/2,TCCSUP,Vero,Hep G2 等細胞 1×10^6 細胞數/ml

hiPS無飼養層凍存液(美國進口)20ml/瓶用于培養人誘導性多能干細胞hiPS(DYR0100、DYP0530)。 1×10^6 細胞數/ml

F-12K*培養液,550ml/瓶適用于培養A549,PC-3,CHO-K1,Lovo等細胞 1×10^6 細胞數/ml

Mitomycin-C 2mg /瓶C,2mg/瓶 1×10^6 細胞數/ml

1640*培養液,550ml/瓶適用于培養NCI-N87,HCC827,NCI-H1395,Jurkat,B95-8,C643,KHM-5M,B-CPAP,KTC-1,NCI-H292等細胞 1×10^6 細胞數/ml

HFF-1 *培養液人皮膚成纖維細胞HFF-1*培養液,600ml/瓶 1×10^6 細胞數/ml

F-12K*培養液,550ml/瓶適用于培養A549,PC-3,CHO-K1,Lovo等細胞 1×10^6 細胞數/ml

關鍵詞:培養箱 顯微鏡

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