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NCI-H446人小細胞肺癌細胞(STR鑒定)NCI-H446細胞株從一位小細胞肺癌患者的胸水中建立。細胞的原始形態并不具有小細胞肺癌特征。這個細胞株是小細胞肺癌的生化和形態學上的變種,表達神經元*的烯醇酶和腦部肌酸激酶同功酶。左旋多巴脫羧酶、蠶素、抗利尿激素、催產素或胃泌激素釋放肽未達到可檢測水平。C-myc DN
英文名稱:Human Small Cell Lung Cancer Cells
NCI-H446人小細胞肺癌細胞(STR鑒定)
英文名稱:Human Small Cell Lung Cancer Cells
規格:1*10 6
細胞介紹
NCI-H446細胞株從一位小細胞肺癌患者的胸水中建立。細胞的原始形態并不具有小細胞肺癌特征。這個細胞株是小細胞肺癌的生化和形態學上的變種,表達神經元*的烯醇酶和腦部肌酸激酶同功酶。左旋多巴脫羧酶、蠶素、抗利尿激素、催產素或胃泌激素釋放肽未達到可檢測水平。C-myc DNA序列擴增約20倍,c-myc RNA比正常細胞增加15倍。zui初傳代培養基用添加10 nM 氫化可的松, 0.005 mg/ml 胰島素, 0.01 mg/ml 鐵傳遞蛋白, 10 nM 17-beta-雌二醇,30 nM 亞硒酸鈉的RPMI 1640, 95%,胎牛血清, 5%。
一、細胞特性
1) 來源:肺;轉移灶:肋膜滲出癌;小細胞肺癌
2) 形態:上皮細胞樣
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
二、細胞收到后處理
NCI-H446人小細胞肺癌細胞(STR鑒定)在培養瓶中培養至良好狀態后灌滿*培養液并封好瓶口是細胞運輸的辦法。收到細胞回到自己的實驗室后,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內,嚴格無菌操作。鏡下觀察:未超過80%匯合度時,可將瓶裝的*培養液移入廢液缸中,原瓶(T25瓶)保留6-8ml*培養液,懸浮細胞需離心處理,放入37℃、5%CO2孵箱培養;超過80%匯合度時,根據情況傳代或者凍存,具體操作見細胞培養步驟。
三、細胞培養步驟
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入6cm皿中,加入約6ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
2、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集,1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,進行離心收集,1000RPM條件下離心5分鐘,去除上清,按凍存數量加入血清及DMSO,凍存比例為90%FBS+10%DMSO。
出現問題,可重發的情況有哪些?判定標準是什么?
(1)細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、破損、漏液等,重發;
★ 注:如運輸過程中導致細胞污染或者死亡,我們將無條件補發 收貨后十個工作日內有其他問題提供照片可半價重發。
相關細胞系列表:
人肺癌細胞;1125 人源 1×10^6 細胞數/ml
人肺癌細胞;1015 人源 1×10^6 細胞數/ml
人肺癌細胞;907 人源 1×10^6 細胞數/ml
雜交瘤細胞;6H7 1×10^6 細胞數/ml
人肺癌細胞;L1022 人源 1×10^6 細胞數/ml
雜交瘤細胞;PCV2/3E5 1×10^6 細胞數/ml
雜交瘤細胞;Mab-boDp1-F14 1×10^6 細胞數/ml
人小細胞肺癌肺轉移細胞;0225-12ScacLym 人源 1×10^6 細胞數/ml
人直腸癌腫瘤工程細胞;ECRC-1 人源 1×10^6 細胞數/ml
鼠雜交瘤細胞;TT3B9 1×10^6 細胞數/ml
雜交瘤細胞;R 1×10^6 細胞數/ml
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