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HL60人早幼粒白血病細(xì)胞(STR鑒定)

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產(chǎn)品型號

品       牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海市

聯(lián)系方式:周經(jīng)理查看聯(lián)系方式

更新時間:2018-05-24 09:50:27瀏覽次數(shù):232次

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經(jīng)營模式:生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品:2964條

所在地區(qū):上海上海市

聯(lián)系人:周經(jīng)理 (銷售經(jīng)理)

產(chǎn)品簡介

HL60人早幼粒白血病細(xì)胞(STR鑒定)HL-60是一株早幼粒細(xì)胞。外周血白細(xì)胞來自一位患有急性粒-單核細(xì)胞白血病的36歲白人女性。 HL-60 自發(fā)分化,丁酸鹽、次黃嘌呤、佛波醇肉豆蔻酸(PMA,TPA)、DMSO(1% to 1.5%)、放線菌素D和視黃酸可以促進(jìn)分化。細(xì)胞表現(xiàn)出吞噬活性,并對趨化刺激有響應(yīng)。致癌基
英文名稱:Human Promyelocytic Leukemia Cells

詳細(xì)介紹

HL60人早幼粒白血病細(xì)胞(STR鑒定)
英文名稱:Human Promyelocytic Leukemia Cells
規(guī)格:1*10 6  
細(xì)胞介紹
HL-60是一株早幼粒細(xì)胞。外周血白細(xì)胞來自一位患有急性粒-單核細(xì)胞白血病的36歲白人女性。 HL-60 自發(fā)分化,丁酸鹽、次黃嘌呤、佛波醇肉豆蔻酸(PMA,TPA)、DMSO(1% to 1.5%)、放線菌素D和視黃酸可以促進(jìn)分化。細(xì)胞表現(xiàn)出吞噬活性,并對趨化刺激有響應(yīng)。致癌基因myc表達(dá)陽性。
一、細(xì)胞特性
1) 來源:外周血;早幼粒細(xì)胞;急性粒-單核細(xì)胞白血病
2) 形態(tài):原粒細(xì)胞,懸浮生長
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
二、細(xì)胞收到后處理
HL60人早幼粒白血病細(xì)胞(STR鑒定)
在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿*培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)霓k法。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內(nèi),嚴(yán)格無菌操作。鏡下觀察:未超過80%匯合度時,可將瓶裝的*培養(yǎng)液移入廢液缸中,原瓶(T25瓶)保留6-8ml*培養(yǎng)液,懸浮細(xì)胞需離心處理,放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng);超過80%匯合度時,根據(jù)情況傳代或者凍存,具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。
三、細(xì)胞培養(yǎng)步驟
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中,加入約6ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1、對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
2、對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集,1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,進(jìn)行離心收集,1000RPM條件下離心5分鐘,去除上清,按凍存數(shù)量加入血清及DMSO,凍存比例為90%FBS+10%DMSO。
出現(xiàn)問題,可重發(fā)的情況有哪些?判定標(biāo)準(zhǔn)是什么?
(1)細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);

  1. 凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
  2. 存活的細(xì)胞靜置24小時后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
  3. 凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時后并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
  4. 視具體情況而定。

 ★ 注:如運(yùn)輸過程中導(dǎo)致細(xì)胞污染或者死亡,我們將無條件補(bǔ)發(fā) 收貨后十個工作日內(nèi)有其他問題提供照片可半價重發(fā)。

相關(guān)細(xì)胞系列表:

綿羊肺細(xì)胞;OAR-L1 羊源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml

大額牛肺細(xì)胞;BFR-L1 牛源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml

赤狐肺成纖維樣細(xì)胞;RF-88L 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml

大額牛皮膚細(xì)胞;BFR-S3 牛源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml

果子貍肺成纖維樣細(xì)胞;MPCL1 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml

赤狐腎上皮樣細(xì)胞;RF-88K 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml

果子貍肺成纖維樣細(xì)胞;MPCL2 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml

關(guān)鍵詞:培養(yǎng)箱 顯微鏡

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