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上海聯(lián)邁生物工程有限公司
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更新時間:2018-05-22 11:18:51瀏覽次數(shù):265次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線HCT-8/FU人結(jié)直腸癌氟尿嘧啶耐藥株這是一株耐藥細胞株。
英文名稱:Human Colorectal Cancer Fluorouracil Resistant Strains
1) 來源:人結(jié)腸癌
2) 形態(tài):上皮細胞樣,貼壁生長
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
HCT-8/FU人結(jié)直腸癌氟尿嘧啶耐藥株
英文名稱:Human Colorectal Cancer Fluorouracil Resistant Strains
規(guī)格:1*10 6
細胞介紹
這是一株耐藥細胞株。
一、細胞特性
1) 來源:人結(jié)腸癌
2) 形態(tài):上皮細胞樣,貼壁生長
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
二、細胞收到后處理
HCT-8/FU人結(jié)直腸癌氟尿嘧啶耐藥株在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿*培養(yǎng)液并封好瓶口是細胞運輸?shù)霓k法。收到細胞回到自己的實驗室后,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內(nèi),嚴格無菌操作。鏡下觀察:未超過80%匯合度時,可將瓶裝的*培養(yǎng)液移入廢液缸中,原瓶(T25瓶)保留6-8ml*培養(yǎng)液,懸浮細胞需離心處理,放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng);超過80%匯合度時,根據(jù)情況傳代或者凍存,具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。
三、細胞培養(yǎng)步驟
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中,加入約6ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
2、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集,1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,進行離心收集,1000RPM條件下離心5分鐘,去除上清,按凍存數(shù)量加入血清及DMSO,凍存比例為90%FBS+10%DMSO。
出現(xiàn)問題,可重發(fā)的情況有哪些?判定標準是什么?
(1)細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
★ 注:如運輸過程中導致細胞污染或者死亡,我們將無條件補發(fā) 收貨后十個工作日內(nèi)有其他問題提供照片可半價重發(fā)。
相關細胞系列表:
新生牛眼Tenon's囊成纖維細胞;NBTF 牛源 1×10^6 細胞數(shù)/ml FDC-P1細胞
Asp2人胚胎腎細胞轉(zhuǎn)化細胞;FC33 人源 1×10^6 細胞數(shù)/ml FO細胞
小鼠單核巨噬細胞白血病細胞;RAW264.7[RAW264.7 小鼠源 1×10^6 細胞數(shù)/ml FOX-NY細胞
人胚腎細胞(亞系克隆);FIP293 人源 1×10^6 細胞數(shù)/ml GL261細胞
兔角膜后基質(zhì)層成纖維細胞;RCBBF 兔源 1×10^6 細胞數(shù)/ml GT1-1細胞
人胚胎眼鞏膜成纖維細胞;HFSF 人源 1×10^6 細胞數(shù)/ml H22細胞
兔角膜前基質(zhì)層成纖維細胞;RCFBF 兔源 1×10^6 細胞數(shù)/ml HePa1-6細胞
人胚胎眼Tenon's囊成纖維細胞;HFTF 人源 1×10^6 細胞數(shù)/ml J774A.1細胞
大鼠氣管上皮細胞;RTE 大鼠源 1×10^6 細胞數(shù)/ml L1210細胞
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