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技術文章

Goldner三色染色液

閱讀:690發布時間:2018-10-24

Goldner三色染色液

產品簡介:

骨染色方法有很多種,例如甲苯胺藍法、阿利新藍法、番紅O 法、Goldner三色染色法等。Goldner 三色染色又稱戈德納三色染色,與 Masson 三色染色類似,三色染色通常是指染胞核和能選擇性的顯示膠原纖維和肌纖維。

三色染色液染色原理與陰離子染料分子的大小和組織的滲透有關:分子的大小由分子量來體現,小分子量易穿透結構致密、滲透性低的組織;而大分子量則只能進入結構疏松的、滲透性高的組織。該染液多用于骨類物質的染色,對細胞染色效果較好,尤其適用于代謝性疾病(Paget 病、骨性營養不良等)的研究,以評估成骨細胞和破骨細胞的活性,并容易辨認骨髓中的轉移性腫瘤細胞。

產品組成

產品

6×50ml

100ml

Storage

試劑(A) :Weigert A1:Weigert 染液 A

25ml

50ml

RT 避光

鐵* A2: Weigert 染液 B

25ml

50ml

RT

臨用前,取 A1、A2 等量混合即為 Weigert 鐵*,不宜提前配制。

試劑(B): 酸性分化液

50ml

100ml

RT

試劑(C): Acid Ponceau 染色液

50ml

100ml

RT 避光

試劑(D): 弱酸溶液

50ml

100ml

RT

試劑(E): Orange G 染色液

50ml

100ml

RT 避光

試劑(F): 亮綠染色液

50ml

100ml

RT 避光

使用說明書

一份

自備材料:

1、系列乙醇

2、蒸餾水

操作步驟 (僅供參考)

1、切片二甲苯脫蠟或脫塑料,乙醇漂洗,入水。

2、入配制好的 Weigert 鐵蘇木素染色 20~30min。

3、流水沖洗 1min,用酸性分化液迅速分化(一般<5s)。

4、流水沖洗 5min,蒸餾水稍洗。

5、入 Acid Ponceau 染色液染色 5min。

6、在上述過程中按蒸餾水:弱酸溶液=4:1 比例配制弱酸工作液,用弱酸工作液洗 15~30s。

7、入 Orange G 染色液染色,直至 Ponceau 染色液,一般需要 3~10min。

8、用配制好的弱酸工作液沖洗 15~30s。

9、直接入亮綠染色液中染色 5min。

10、用配制好的弱酸工作液沖洗 3 次,每次 15s。

11、蒸餾水沖洗,吸干或晾干,無水乙醇快速脫水,中性樹膠封固。

染色結果 

礦化骨

綠色

類骨質

橙色-紅色

軟骨

 

細胞核

藍色-灰色

注意事項:

1、切片脫蠟應盡量干凈。固定起著重要的作用,使用不同的固定液可延或縮短染色時間。

2、取A1、A2等量混合即為Weigert 鐵蘇木素染液,一般24h失去染色力。

3、酸性分化時間應根據切片厚薄、組織的類別和新舊而定。

4、弱酸溶液可使色彩更清晰鮮艷,如使用量大可自行配制0.1~1%乙酸溶液予以替代。

5、Orange G染色液染色時在鏡下控制,以麗春紅脫去為準。

有效期12 個月有效。


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