上海邦景實業有限公司
主營產品: 進口elisa試劑盒,細胞株,細胞系,菌種 |
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- 地址:
- 上海市閔行區碧泉路36弄銀宵大廈
- 郵編:
- 200000
- 網址:
- www.bhsy-e.com/
參考價 | ¥324-¥960 |
-
型號
-
品牌
其他品牌 -
廠商性質
經銷商 -
所在地
上海市
125ML | 324元 | 15 瓶 可售 |
500ML | 960元 | 15 瓶 可售 |
更新時間:2024-03-06 14:48:06瀏覽次數:175
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產品簡介:
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
NCI-H292人肺癌(淋巴結轉移)細胞專用培養基 | 125ML、500ML | BJ-X259 |
NCI-H292細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持NCI-H292細胞的生長狀態。本產品中已包含NCI-H292細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于NCI-H292細胞的體外培養。本產品僅供進一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其它用途。
產品形態 | 液體 |
產品濃度 | 1× |
產品規格 | 125mL×4 |
培養基成分 | RPMI-1640+10% FBS+1% P/S |
細菌檢測 | 陰性 |
真菌檢測 | 陰性 |
支原體檢測 | 陰性 |
細胞生長實驗 | 細胞生長良好,形態正常 |
內毒素含量(EU/mL) | ≤3 |
儲存條件 | 2℃-8℃,避光儲存 |
運輸條件 | 冰袋冷藏運輸 |
有效期 | 3個月 |
細胞培養具體步驟:
一、常用設備
1. 準備室的設備
單蒸餾水蒸餾器、雙蒸餾水蒸餾器、酸缸、烤箱、高壓鍋、儲品柜(放置未消毒物品)、儲品柜(放置消毒過的物品)、包裝臺。配液室的設備:扭力天平和電子天平(稱量藥品)、PH計(測量培養用液PH值)、磁力攪拌器(配置溶液室攪拌溶液)。
2. 培養室的設備
液氮罐、儲品柜(存放雜物)、日光燈和紫外燈、空氣凈化器系統、低溫冰箱(-80℃)、空調、二氧化碳缸瓶、邊臺(書寫實驗記錄)。
3. 必須放在無菌間的設備
離心機(收集細胞)、超凈工作臺、倒置顯微鏡、CO2孵箱(孵育培養物)、水浴鍋、三氧消毒殺菌機、4℃冰箱(放置serum和培養用液)。
二、無菌操作
(一)無菌室的滅菌
1.定期打掃無菌室:每周打掃一次,先用自來水拖地、擦桌子、超凈工作臺等,然后用3‰來蘇爾或新潔爾滅或0.5%過氧乙酸擦拭。
2.CO2孵箱(培養箱)滅菌:先用3‰新潔爾滅擦拭,然后用75%酒精擦拭或者0.5%過氧乙酸,再用紫外燈照射。
3.實驗前滅菌:打開紫外燈、三氧殺菌機、空氣凈化器系統各20-30分鐘。
4.實驗后滅菌:用75%酒精(3‰新潔爾滅)擦拭超凈臺、邊臺、倒置顯微鏡的載物臺。
細胞培養方法:
01 原代培養操作步驟
原代培養的操作步驟為:取材→分離→培養。
(1)取材:對于不同的組織有不同的取材方法,但均應保持材料的新鮮及嚴格無菌。
細胞傳代培養操作步驟如下:
(1)傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態和生長密度,當細胞生長密度達到80%~90%時,即可進行傳代。
(2)吸掉或倒掉培養瓶內的培養液。加入PBS清洗1~2次,左右輕輕搖晃后棄掉。
(3)根據培養瓶大小向瓶內加入適量含EDTA的,一般應覆蓋整個培養瓶底。
(4)把培養瓶放入37℃ CO2培養箱進行消化,2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察,當發現有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時,再輕輕拍打培養瓶使剩余細胞脫落,然后立即加入2倍量的培養液中止消化,使用吸頭輕輕吹打,混合均勻,以防消化過度。
(5)吸出所有細胞懸液至離心管內,1000rpm/min離心3~5min。
(6)棄上清,加入適量培養液重懸細胞,輕輕吹打混勻,使細胞均勻分散。
(7)用吸頭吸取適量細胞懸液,以適宜的密度接種于新的培養瓶中,補足培養液,搖勻,放置于37℃ CO2培養箱中進行培養。
(8)根據細胞生長狀態確定換液或傳代時間,甚至進行細胞凍存。
注意事項:
(1)嚴格進行無菌操作,所用一切試劑及耗材均應無菌,且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上,以免細胞發生污染。
(2)所用培養液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞,對培養液的要求不一樣,必要時可用預實驗的方法選擇適當的培養液。
(3)胎牛血清對于維持細胞生存,促進細胞生長起著關鍵作用。可根據文獻或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定,就應保持用至實驗完成。
(4)消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不,收集到的細胞數量少,或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離,這時的細胞已有損傷或死亡,影響細胞數量和實驗進度。
(5)細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數量不夠,或離心力過大對細胞產生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后,應先彈散細胞沉淀,再加入培養液重懸,這樣比直接吹打對細胞損傷小,可以提高細胞活率。
(6)吹打細胞時應盡量避免細胞的產生,以免損傷細胞,影響細胞狀態(吹打過程中殘留部分液體在吸頭內可以減少氣泡的產生)。
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