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上海邦景實業有限公司

主營產品: 進口elisa試劑盒,細胞株,細胞系,菌種

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BCA Protein Assay Kit
BCA Protein Assay Kit
參考價312
具體成交價以合同協議為準
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  • 廠商性質

    經銷商
  • 所在地

    上海市

規格
50-500T312元15 盒 可售

更新時間:2024-01-25 12:36:59瀏覽次數:146

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【簡單介紹】
貨號 BJ-PJ6655 規格 50-500T
品牌 邦景 用途 僅供科研研究實驗
BCA Protein Assay Kit公司正在出售的產品:Tth PrimPol primase馬皰疹病毒1型探針法熒光定量PCR試劑盒人結腸腺癌肺轉移細胞T84(STR鑒定正確)Tth UvrD馬皰疹病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒人口腔鱗癌細胞SCC-25(STR鑒定正確)

公司產品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!

產品名稱

規格

貨號

BCA Protein Assay Kit

50-500T

BJ-PJ6655

描述:BCA 蛋白質定量試劑盒(BCA Protein Assay Kit)是根 據目前世界上常用的蛋白濃度檢測方法之一-BCA (bicinchoninic acid)法改良研制而成,該試劑盒具有蛋白 濃度測定的簡單性,高穩定性,高靈敏度和高兼容性。本試 劑盒的原理是蛋白質分子中的肽鍵結構在堿性環境下能與 Cu2+絡合生成絡合物,將 Cu2+還原成 Cu+,而 BCA 試劑可 敏感特異地與 Cu+結合,形成穩定的有顏色的復合物,并在 562nm 處有大光吸收值,該復合物顏色深淺與蛋白質濃度 成正比,可根據吸收值的大小來測定蛋白的含量,1 小時內 即可完成蛋白定量檢測。本試劑盒含有牛血清白蛋白(BSA) 溶液作為蛋白質標準溶液,測定范圍為 25~2000 μg/ml。該 試劑盒可用于 20 次試管檢測或 200 次 ELISA 板檢測。

操作方法
1. 標準品的稀釋:按下表將 BSA 進行稀釋。
管號 PBS
BSA 體積
(來源)
BSA 終濃度
(μg/ml)
A 0 300 μl (母液) 2000
B 125 μl 375 μl (母液) 1500
C 325 μl 325 μl (母液) 1000
D 175 μl 175 μl (B 管) 750
E 325 μl 325 μl (C 管) 500
F 325 μl 325 μl (E 管) 250
G 325 μl 325 μl (F 管) 125
H 400 μl 100 μl (G 管) 25
I 400 μl 0 0
2. BCA 工作液的配置:根據樣品數量及測定方法,將 BCA Reagent A 和 BCA Reagent B 按體積比 50:1充分混勻即可。
注意:配制 BCA 工作液前請將 BCA Reagent A 混勻。
3. 標準比色杯測定方法
(1)吸取 0.1 ml 的各標準品和待測樣品置于合適的管中。
(2)加入 2 ml BCA 工作液,充分混勻。
(3)37℃孵育 30 min,然后室溫靜置 10 min。
(4)紫外分光光度計于 562 nm 處檢測吸光度。
(5)繪制標準曲線。
(6)根據標準曲線計算出樣品的蛋白濃度。
4. 微管測定方法
(1)分別取 25 μl 新鮮配制的 BSA 標準液和待測樣品,加入到 ELISA 反應板中。
(2)每孔加入 200 μl BCA 工作液,充分混勻。
(3)37℃孵育 30 min,然后室溫靜置 10 min。
(4)酶標儀于 562nm 處檢測吸光度。
(5)繪制標準曲線。
(6)根據標準曲線計算出樣品的蛋白濃度。
注意事項
1. 待測樣品濃度在 25~2000 μg/ml 的范圍內具有良好的線性關系。
2. BCA 工作液配制后 24 小時內使用效果穩定。
3. BCA 法測定蛋白濃度時,吸光度會隨著時間的延長不斷加深。并且顯色反應會因溫度升高而加快。如果濃度較低,適合在較高溫度孵育,或延長孵育時間。
4. 使用普通的分光光度計測定時,需根據比色皿的小檢測體積,適當加大 BCA 工作液的用量,使其不小于小檢測體積,樣品和標準品的用量可相應按比例調整。
5. 適用范圍

實例操作 按上述操作方法可得到如下標準工作曲線,該線性方程經過 多次繪制,系數均為 0.0001,且 R 2 值均在 0.99~1 之間, 重復性好,在計算蛋白濃度時可直接用該標準工作曲線進行 計算。例如:在 562 nm 處檢測吸光值為 0.1,則此時 y 值 為 0.1,代入方程 y=0.0001x 中,可得蛋白濃度為 1000 μg/ml。

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