上海邦景實業有限公司
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- 郵編:
- 200000
- 網址:
- www.bhsy-e.com/
參考價 | ¥312 |
-
型號
-
品牌
其他品牌 -
廠商性質
經銷商 -
所在地
上海市
100ml | 312元 | 15 盒 可售 |
更新時間:2024-02-01 15:06:01瀏覽次數:146
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產品名稱 | 規格 | 貨號 |
大腸桿菌蛋白提取液 | 100ml | BJ-PJ6654 |
描述:生產的大腸桿菌蛋白提取液采用的中性裂解 配方,從而大限度的提高了后續提取蛋白的活性。使用該 溶液從大腸桿菌中提取蛋白不需要超聲波破碎等復雜的操 作步驟,溶液置于 4°C 可長期保存,使用方便。該溶液室溫 30min 可破碎 95%以上的細胞,裂解后的溶液可直接通過 Ni-NTA 等純化填料進行蛋白純化。該溶液既可適用于小量 蛋白表達檢測,也適用于大量蛋白的表達純化試驗;既適用 于純化可溶型蛋白,也適用于純化包涵體蛋白。
主要特征
? 單組分溶液,使用方便
? 裂解迅速,蛋白不會變性
? 適用于小量或大規模蛋白表達
? 適用于可溶性蛋白和包涵體純化
應用:大腸桿菌的裂解和包涵體純化。
儲存:置于 4°C 可保存 2 年。
操作方法
? 可溶型蛋白操作方法(1 ml 菌液為例)
1. 8,000rpm 室溫離心 3min 后,棄上層培養基,留取管底部菌體(盡量棄除掉培養基)。
2. 加入 200 μl(重懸體積不得少于 50 μl)大腸桿菌蛋白提取液重懸菌體,用吸頭吹打至無可見細胞團塊。
注:為降低溶液粘度,可加入 Benzonase 核酸內切酶至 0.25U/μL;加入終濃度為 1 mg/ml 的溶菌效果更佳。
3. 置于室溫孵育 30-60min,期間輕彈離心管數次以加速裂解。
4. 裂解完成后 13,000rpm 于 4℃離心 15-20min,將上清轉移至新的容器中,溶液可直接進行下一步純化或檢測試驗。
? 包涵體蛋白操作方法
5. 上述步驟 4 中,棄上清,保留沉淀組分,用 200 μl 的大腸桿菌蛋白提取液重懸沉淀。
6. 加入溶菌至終濃度 1 KU/ml,混合均勻,室溫孵育 10min。
7. 加入 800 μl 的滅菌水混合均勻。
8. 13,000 rpm 室溫離心 15-20min,棄上清后用 900 μl 滅菌水重懸沉淀,然后加入 200 μl 大腸桿菌蛋白提取液,混合均勻。
9. 13,000rpm 室溫離心 15-20min,重復步驟 8 三至五次。
10. 將沉淀溶解于變性溶液中,進行下一步純化或復性試驗。
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