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上海邦景實業有限公司

主營產品: 進口elisa試劑盒,細胞株,細胞系,菌種

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公司信息

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劉小姐
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021-52960952
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021-57690166
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上海市閔行區碧泉路36弄銀宵大廈
編:
200000
址:
www.bhsy-e.com/
鋪:
http://www.kindlingtouch.com/st582730/
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LAMP Loop DP-Probe (訂制品)
LAMP Loop DP-Probe (訂制品)
參考價2340
具體成交價以合同協議為準
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  • 廠商性質

    經銷商
  • 所在地

    上海市

規格
800Tx25μl2340元15 盒 可售

更新時間:2024-01-09 14:46:19瀏覽次數:194

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【簡單介紹】
貨號 BJ-PJ6578 規格 800Tx25μl
品牌 邦景 用途 僅供科研研究實驗
LAMP Loop DP-Probe (訂制品)公司正在出售的產品:Bst 4.0 DNA/RNA聚合酶(8U/ul)茹拉巴德古柏線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒高轉移人肝癌細胞帶熒光素酶MHCC97-H+LUC(STR鑒定)Bst 4.0 DNA/RNA聚合酶(32U/ul)無甘油牛棒桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒人食管上皮細胞HEEC(STR鑒定正確)

公司產品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!

產品名稱

規格

貨號

LAMP Loop DP-Probe (訂制品)

800Tx25μl

BJ-PJ6578

該 DP-Probe(DisPlaceable Probe)為鏈置換熒光探針,專用于LAMP 的熒光擴增。Loop DP-Probe 在搭配 HotStart Bst4.2 Basic 試劑時表現出極為出色的特異性,可以大幅降低非特異性擴增。LoopDP-Probe Pair 是將 Loop 引物進行改造(LF/B 任意一條均可),其由兩條標記引物退火組成:熒光猝滅引物(5’IBFQ+Tail+Loop)和熒光報告引物(Tail 互補區+3’發光基團),其不發熒光。在 LAMP反應中 Loop 引物滲入到“啞鈴"結構,由擴增返回“啞鈴"延伸并置換游離的熒光報告引物,累積產生熒光信號。有經驗的研究人員可根據參考文獻自行制備 LAMP Loop DP-Probe Pair,經驗不足的人員可委托  來制備, 提供三種熒光標記的探針。需要客戶提供 Loop 序列,并指明需要的熒光標記(FAM/JOE/ROX)。
image.png

eLAMP DP-Probe 試劑的開發簡述
1. 引物的粗篩選
無論是變色、試紙條、熒光法 eLAMP 試劑的開發,前期的測試過程, 推薦采用價格較低的液體 HotStart Bst4.2 SYBR Green試劑(進行粗篩選。通常篩選的引物為 3-5 組。10xeLAMP Mix:FIP/BIP=8 μM each; LF/LB=4 μM each.測試樣品:10e3、100、25、10Copies/管,NTC(16-32 重復)
2.5xBst4.2 SYBR Green Mix 10 μl
10x ePrimer Mix 2.5 μl
HotStart Bst 4.2(8U/μl) 1 μl
模板 DNA/RNA X μlddH2O 到總體積 25 μl置于 70°C 反應 45min,1min 收集一次熒光信號。

良好的引物組具有 以 下 特 性 (Ct) :

10e3copies =5-10min; 25copies<15min;10Copies<20min, ntc="">40min. 以上實驗需要反復確認,以確
保核心引物的工作效率,否則重新篩選,再進行后續的其它測試。
2. Loop DP-Probe Pair 的制備
根據上述引物組的篩選情況,選取佳引物組。在此基礎上改造LF 或 LB,改造哪一條效果更佳,必須經過測試。下面以改造 LF為例進行說明。 通常提供 25x 的 LF DP-Probe Pair(或自行制備)。

注意:

(1)測試試劑更改為 HotStart Bst4.2 Basic 試劑。

(2)10xeLAMP Mix 引物濃度有調整。
10xeLAMP Mix:FIP/BIP=8 μM each; LB=4 μM;LF=3 μM.
2.5xBst4.2 Basic Mix 10 μl
10x ePrimer Mix 2.5 μl
25x LF DP-Probe Pair 1 μl
HotStart Bst 4.2(8U/μl) 1 μl
模板 DNA/RNA X μl
ddH2O 到總體積 25 μl
置于 70°C 反應 45min,1min 收集一次熒光信號(注意根據探針熒光標記,選取正確的熒光通道)。與 SYBR Green 結果相比來看,時間會滯后 1-3min。NTC 的控制會明顯提升。

此時可進一步做后續的其它項目測試。
3. 如有試劑凍干制備的需求可采用如下幾種方案:
(1)(液體試劑)+PrimerMix 自行凍干(專業人員使用)。
(2)PrimerMix+(引物凍干劑)自行凍干,加入 (凍干球)。
(3)(HotStart Bst4.2),全程自行凍干(專業人員使用)。
(4)委托  進行全體系凍干。

公司正在出售的產品:

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