上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品: 進(jìn)口elisa試劑盒,細(xì)胞株,細(xì)胞系,菌種 |
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15000017673
公司信息
- 聯(lián)系人:
- 劉小姐
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- 021-52960952
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- 傳真:
- 021-57690166
- 地址:
- 上海市閔行區(qū)碧泉路36弄銀宵大廈
- 郵編:
- 200000
- 網(wǎng)址:
- www.bhsy-e.com/
參考價(jià) | ¥1076.4 |
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型號(hào)
-
品牌
其他品牌 -
廠商性質(zhì)
經(jīng)銷(xiāo)商 -
所在地
上海市
50ml×2 | 1076.4元 | 15 盒 可售 |
更新時(shí)間:2024-01-09 14:53:20瀏覽次數(shù):146
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公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
TRzol LS(液體樣本 RNA 提取試劑) | 50ml×2 | BJ-PJ6323 |
儲(chǔ)存條件:
TRzol LS 在室溫下能穩(wěn)定保存 12 個(gè)月。盡管如此,為達(dá)到佳效果,我們建議保存在 2-8°C 的環(huán)境下。
重要提示:
有毒物接觸皮膚或者不慎吞服,會(huì)導(dǎo)致灼傷。一旦接觸皮膚后立即以大量的洗滌劑和清水清洗。若感不適,看醫(yī)生并尋求和其他成分的正確治療方案。
產(chǎn)品介紹:
TRzol LS試劑是直接從細(xì)胞或組織中提取總RNA的試劑。它在破碎和溶解細(xì)胞時(shí)能保持RNA的完整性。加入氯仿后離心,樣品分成水樣層、中間層和有機(jī)層。RNA存在于水樣層中。收集上面的的水樣層后,RNA可以通過(guò)異丙醇沉淀來(lái)回收。無(wú)論是人、動(dòng)物、植物還是細(xì)菌,該方法對(duì)少量及大量的組織和細(xì)胞均有較好的分離效果。TRzol LS 試劑操作上的簡(jiǎn)單性允許同時(shí)處理多個(gè)樣品。所有的操作可以在一小時(shí)內(nèi)完成。TRzol 抽提的總 RNA 能夠避免DNA 和蛋白的污染,可用于 RNA 印跡分析、斑點(diǎn)雜交、poly(A)+篩選、體外翻譯、RNA 酶保護(hù)分析和分子克隆。如果是用于 PCR,當(dāng)兩條引物位于單一外顯子內(nèi)時(shí),建議用擴(kuò)增級(jí)的DNase I 來(lái)處理抽提的總RNA。
注意事項(xiàng):
1.從少量的組織(1~10mg)或細(xì)胞(10 2-10 4 個(gè))中分離RNA 樣品:往組織或細(xì)胞中加 入 800µl TRzol。待樣品裂解后,加入氯仿并進(jìn)行步驟 2 中的抽提操作。在用異丙醇沉 淀 RNA 之前,加入 5~10μg 無(wú) RNA 酶的glycogen 作為水樣層的載體。為降低其黏度 在加入氯仿前用 26 號(hào)注射器抽吸兩次以切斷基因組DNA。Glycogen 會(huì)留在水樣層中 并和 RNA 共析出。在濃縮到 4mg/ml 之前它不會(huì)抑制逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)第鏈的合成也不會(huì) 抑制 PCR。
2.在勻漿化后和加入氯仿之前,樣品可以在-60℃或者-70℃保存至少一個(gè)月。將 RNA 沉淀溶于 75%的乙醇在 2-8℃至少可以保存一周,在-5—-20℃下至少可保存一年。
3.用 TRzol LS 抽提 RNA 時(shí)要戴手套和護(hù)眼罩。避免接觸皮膚和衣服。在化學(xué)通 風(fēng)櫥完成操作。避免呼吸道吸入。如無(wú)例外,室溫保持在 15~30℃的條件下。
自備試劑:
氯仿 、 異丙醇、75%乙醇(RNase-Free water 配制)、RNase-Free water(將水加入 無(wú) RNA 酶的玻璃瓶中,加入 DEPC 至 0.1% (V/V)。放置過(guò)夜并高壓滅菌)。0.5% SDS 溶液(RNase-Free water 配制)(可選)。
操作步驟:
1.樣品預(yù)處理 a.生物液體 每0.25ml液體樣品(血清,血漿等等)加入0.75ml TRzol LS,用加樣槍吹打液體樣品 幾次以幫助裂解樣品中細(xì)胞。每5~10×10 6個(gè)細(xì)胞至少加入0.75ml TRzol LS。對(duì)于含有高 污染物樣品如全血樣品,可以用滅菌水按照1:1比例稀釋一倍后開(kāi)始提取。TRzol LS 和液體樣品的終體積比總是3:1。 b.組織 用glass或強(qiáng)力勻漿器攪勻組織樣品,每50~100mg組織或者0.25ml組織懸液加 0.75ml的TRzol LS。一般50~100mg組織體積都要小于0.25ml,如果組織樣品的體積小 于0.25ml,加入滅菌水將組織樣品體積調(diào)整到0.25ml以保證體積比例是3:1。 c.單層生長(zhǎng)的細(xì)胞 直接往直徑3.5 cm的培養(yǎng)板中加入0.3ml-0.4ml的TRzol LS溶解細(xì)胞,用加樣槍吹打 幫助充分裂解細(xì)胞。依據(jù)培養(yǎng)板的面積而不是依據(jù)細(xì)胞的數(shù)量來(lái)決定所需的TRzol LS 量 (每10cm2加0.3-0.4ml)。不需要往裂解物里面加水,因?yàn)榕囵B(yǎng)板中附著殘留的培養(yǎng)液 已經(jīng)充分稀釋了TRzol LS 。 d.懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞 通過(guò)離心來(lái)沉淀細(xì)胞。在TRzol LS試劑中用移液管反復(fù)吹打來(lái)裂解細(xì)胞。每 5~10×10 6的動(dòng)物細(xì)胞,植物或酵母菌細(xì)胞或每1×10 7細(xì)菌加0.75ml的TRzol LS。和步驟 b 一樣用滅菌水調(diào)節(jié)樣品體積到0.25ml。在加入TRzol LS前應(yīng)避免洗滌細(xì)胞,因?yàn)槟?樣會(huì)增加mRNA降解的可能性。破裂某些酵母菌和細(xì)菌可能需要使用勻漿器。 2.分離階段 將勻漿樣品在15-30°C條件下孵育5min以使核蛋白體分解。每0.75ml TRzol LS 加0.2ml氯仿。蓋緊樣品管蓋,用手用力搖晃試管15秒并將其在室溫下孵育2~15 min。 在2~8°C下以不超過(guò)12,000×g的離心力高速冷凍離心15 min。離心后混合物分成三層: 下層-氯仿層,中間層,上層無(wú)色的水樣層。RNA無(wú)一例外地存在于水樣層當(dāng)中。 水樣層的容量大約為所加TRzol LS 容量的70%。
2.RNA 的沉淀 將水樣層轉(zhuǎn)移到一干凈的試管中,如果希望分離DNA和蛋白,有機(jī)層和中間層同 樣要予以保留。通過(guò)將水樣層和異丙醇混合來(lái)沉淀RNA。每0.75ml TRzol LS對(duì)應(yīng)0.5ml 異丙醇。將混合的樣品在15-30°C條件下孵育10min并在2~8°C下以不超過(guò)12,000×g的離 心力高速冷凍離心10 min。RNA沉淀在離心前通常不可見(jiàn),離心后會(huì)形成一膠狀片狀 沉淀附著于試管壁和管底。
3.RNA 的漂洗 移去上層懸液。用75%的乙醇(RNase-Free water配制)洗滌RNA沉淀一次,每0.75ml 的TRzol LS至少加1ml的75%乙醇。旋渦振蕩混合樣品并在2~8°C下以不超過(guò)7,500×g的 離心力高速冷凍離心5 min。
4.RNA 的再溶解 室溫簡(jiǎn)單干燥 RNA 沉淀,不要在真空管里離心干燥 RNA。尤為重要的是,不能讓 RNA 沉淀干燥那樣會(huì)極大地降低它的可溶性。部分溶解的 RNA 樣品其 OD260 /OD280 比值<1.6 。用移液管分幾次移取 RNase-Free water 或 0.5%SDS 溶液 (RNase-Free water 配制)來(lái)溶解RNA(如果RNA 以后要用于酶切反應(yīng)時(shí),避免使用SDS。) RNA 還能被 1甲酰胺(除去離子)再溶解并保存在-70°C。
公司正在出售的產(chǎn)品:
干擾su調(diào)節(jié)因子7封閉多肽 | 小鼠小腸平滑肌細(xì)胞 |
多配體聚糖4封閉多肽 | 人白血病HL-60細(xì)胞耐藥細(xì)胞株 |
組織因子途徑抑制劑封閉多肽 | 小鼠雜交瘤細(xì)胞;IIID12-G7 |
上皮細(xì)胞特異性蛋白1封閉多肽 | 人橫紋肌肉瘤細(xì)胞;RD |
脂聯(lián)su受體2封閉多肽 | 組織胞漿菌通用PCR試劑盒 |
FAM131B蛋白封閉多肽 | 組織胞漿菌通用PCR試劑盒 |
多能發(fā)育相關(guān)基因5封閉多肽 | (駱駝痘病毒PCR試劑盒 |
胰島su樣生長(zhǎng)因子2mRNA結(jié)合蛋白3封閉多肽 | 異尖線蟲(chóng)(Ani)核suan檢測(cè)試劑盒 |
乙型肝炎病毒X抗原激活蛋白5封閉多肽 | 組織胞漿菌通用PCR檢測(cè)試劑盒 |
大鼠軟骨肉瘤細(xì)胞 | 腺病毒型PCR檢測(cè)試劑盒 |
大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞 | 組織相容性2-K1-K |
大鼠雪旺細(xì)胞;RSC96 | 11-β-羥基類(lèi)固醇脫氫mei3ELISA試劑盒 |
小鼠雜交瘤細(xì)胞;IIB13 | TRzol LS(液體樣本 RNA 提取試劑)硒蛋白SELISA試劑盒 |
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人乳腺癌細(xì)胞;MCF7-Cas9-544 | 1型1-磷suan鞘氨醇受體ELISA試劑盒 |
小鼠雜交瘤細(xì)胞株;4A4 | Ⅰ型前膠原氨基端肽ELISA試劑盒 |