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操作流程：
1待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。
2酶標板置4℃，包被過夜。
3洗板：吸干孔內反應液，用洗滌液過洗一遍將洗滌液注滿板孔后，即甩去，之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
4陰性對照孔每孔加入pbs 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人aif抗體工作液50μl。
5酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。
6洗板，同4。
7每孔加1:5000稀釋的hrp-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
8酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。
9洗板，同4。
10每孔加tmb顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。
11每孔加100μl 2mol/l h2so4終止反應。
12分別測450nm 吸光值w1和630nm吸光值w2，終測得的od值為兩者之差w1-w2，以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
13數據處理：在得出標本s和陰性對照n的 od值后，計算s/n值。s/n≥2.1為陽性判定標準。

試劑盒組成及試劑配制：
1. 酶聯板（Assay plate ）：一塊（96孔）。
2. 標準品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4. 標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6. 標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7. 辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
試劑和樣本的控制方法：
一、試劑
1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關，我司嚴格按照進行，已獲得國家承認的“三證"，每一個產品都有對應的批號，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產品，不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。
2.試劑的準備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應微孔內的溫度較快地達到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內源性干擾因素：包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；
類風濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②標本用聯有熱變性IgG的固相吸附劑處理；
③檢測抗原時，可用加入到標本稀釋液中使RF降解。
ELISA 試驗時，注意事項如下：
1. 正式試驗時，應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件，待檢樣品應作一式二份，以保證實驗結果的準確性。有時本底較高，說明有非特異性反應，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中，進行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括:
（1） 固相載體的選擇：許多物質可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應，觀察其顯色反應是否均一性，據此判明其吸附性能是否良好。
（2） 包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時。蛋白質包被的zui適濃度需進行滴定：即用不同的蛋白質濃度（0.1、1.0和10μg／ml等）進行包被后，在其它試驗條件相同時，觀察陽性標本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數蛋白質來說通常為1～10μg／ml。
（3） 酶標記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定（見酶標記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法"（包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實驗系統里準確地滴定其工作濃度。
（4） 酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應，而本身無色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后，應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入 。
S-乙酰半鹽酸  S-Acetamidomethyl-L-cysteine   質量規格：>98%,BR 人鈣粘蛋白相關的受體1(C-1)ELISA檢測試劑盒Humancadherln-relatedneuronalreceptor1,C-1ELISAKit 96T/48T

O-叔丁基-L-甲酯鹽酸鹽  O-tert-Butyl-L-threonine methyl ester   質量規格：0.98 人鈣粘蛋白相關的受體1(C-1)試劑盒 Human C-1 ELISA Kit

L-丙異丙酯鹽酸鹽  L-Alanine isopropyl ester   質量規格：>98% 人鈣轉運ATP酶2C型成員1(ATP2C1)試劑盒 human ATP2C1 ELISA Kit

L-天冬酰胺甲酯鹽酸鹽  Methyl L-asparaginate mono  質量規格：0.98 人甘試劑盒 Human Glycin ELISA Kit

L-天冬二叔丁基酯鹽酸鹽  L-Aspartic acid di-tert-butyl ester   質量規格：>98%,BR 人甘酸(CG)ELISA檢測試劑盒Humancholyglycine,CGELISAKit 96T/48T

L-叔丁酯鹽酸鹽  L-Glutamine t-butyl ester   質量規格：0.98 人甘酸(CG)試劑盒 Human cholyglycine,CG ELISA Kit

L--5-叔丁酯-1-甲酯鹽酸鹽  L-Glutamic acid 5-tert-butyl 1-methyl ester    質量規格：>95%,BR 人甘露聚糖結合凝集素絲肽1(C4/C2 RA反應因子的激活因子)(MASP1)試劑盒 Human MASP1 ELISA Kit

N-芐基甘鹽酸鹽  Bzl-Gly-OH·HCl  質量規格：0.98 人甘露糖(Mannose)ELISA檢測試劑盒HumanMannoseELISAKit 96T/48T

甘芐酯鹽酸鹽  Glycine benzyl ester   質量規格：0.98 人甘露糖(Mannose)試劑盒 Human Mannose ELISA Kit

L-異叔丁酯鹽酸鹽  L-Isoleucine t-butyl ester   質量規格：>98%,BR 人甘露糖結合蛋白/甘露糖結合凝集素(MBP/MBL)ELISA檢測試劑盒HumanMannmabindingprotein/mannanbindinglectin,MBP/MBLELISAKit 96T/48T
植物B6(VB6)ELISA試劑盒     Trimethoprim   分子式：C14H18N4O3 

植物B6(VB6)ELISAKit                 Trillin  14144-06-0  中文名：延齡草苷  分子式：C33H52O8 

植物B12elisa試劑盒   植物B12試劑盒   規格型號：96T/48T   植物B12試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：植物B12試劑盒、植物B12eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  Testosterone    中文名：  分子式：C19H28O2  度：98.0%  關鍵詞： 

植物B12(VB12)ELISA試劑盒     Trimethoprim  738-70-5  分子式：C14H18N4O3  度：98.0%  關鍵詞： 

植物B12(VB12)ELISAKit     Troxerutin  7085-55-4  中文名：  分子式：C33H42O19  度：98.0%  關鍵詞：
小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白1(IGFBP-1)elisa檢測試劑盒
Mouse TRAIL R4 檢測試劑盒人肝X受體α(LXRα)elisa檢測試劑盒

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人甘油醛-3 - 磷酸脫氫酶(GAPDH/G3PDH)elisa檢測試劑盒
注：本公司提供試劑盒免費代測服務。需要其他Elisa試劑盒請咨詢銷售人員。產品僅用于科研