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上海邦景實業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品： 進口elisa試劑盒，細胞株，細胞系，菌種 |
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- 網(wǎng)址：
- www.bhsy-e.com/
| 參考價 | 面議 |
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- 品牌 其他品牌
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- 所在地 上海市
更新時間：2022-06-22 15:20:37瀏覽次數(shù)：144
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生物醫(yī)學實驗中，常常需要從液體樣品(如血漿，培養(yǎng)基)中純化病毒，但由于病毒顆粒十分細小，傳統(tǒng)的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來，此操作非常繁瑣，并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點，本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。
中文名稱：全蛋白提取試劑盒(中)
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：50T|100T
發(fā)貨周期：1～3天
產(chǎn)品貨號：BJ-F0165130
產(chǎn)品介紹：
全蛋白提取試劑盒(中)用于哺乳動物組織和細胞中提取總蛋白，試劑盒中的裂解液含有蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑，作用較為溫和，可快速獲得總蛋白，可用于免疫印跡實驗等基礎研究實驗，由于含有上述的酶抑制劑，不能用于研究蛋白和磷酸的研究。 操作方法: 1、組織總蛋白的提取 (1)在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻，放置在冰上備用; (2)稱取0.1g的新鮮組織，放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處，用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎，然后加入0.5～1ml的新配置的裂解液，研磨直至沒有明顯的組織塊，這個過程注意冰上操作; (3)將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中，4℃12000g離心30min; (4)吸取上清至新的管中; (5)進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。 (提取好的蛋白建議保存于-80℃，即用即取，避免反復凍融，避免長時間儲存。) 2、細胞總蛋白的提取 (1)裂解液的用量：107個細胞需要裂解液1ml; (2)貼壁細胞：棄去培養(yǎng)基，用冷的PBS洗兩次，棄去PBS，然后加入計算好的細胞裂解液;在冰上用細胞刮刀進行刮離細胞，將刮離的細胞裂解液移入EP管中，顛倒裂解20-30min (3)懸浮細胞：4℃,400g離心收集細胞，用冷的PBS洗兩次細胞，同樣按細胞數(shù)加入裂解液，渦旋10s，放置冰上裂解10min，重復3～4次; (4)裂解完畢之后，將細胞裂解液4℃12000g離心30min; (5)將上清移入新的EP管中; (6)進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。 (提取好的蛋白建議保存于-80℃，即用即取，避免反復凍融，避免長時間儲存。) 注意事項： 1、實驗過程，所有試劑都要需要預冷或者即融，保證操作過程中的低溫環(huán)境; 2、PSMF(有毒)現(xiàn)用現(xiàn)加，因為PMSF在水溶液中會快速降解; 儲存條件 ：-20℃ |
使用方法：本產(chǎn)品僅用于科研
注意：標本采集人員需按有關規(guī)定做好個人防護。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集：將棉簽輕輕插入鼻道內鼻腭處，停留片刻后緩慢轉動退出。以同一拭子拭兩側鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集：用棉簽擦拭雙側咽扁桃體及咽后壁，將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標本放入大小適合的塑料袋內密封；每袋裝一份標本。同時也將標本有關信息填在標本送檢表上，連同一級容器封于塑料袋內。
將裝標本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內，擰緊蓋，在容器上標明有關信息。同一患者2份以上的密封標本，可以放在同一個二級容器內。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力，內襯具吸水和緩沖能力的物質。所有容器必須印有生物危險標注。
將二級容器擺放在專用運輸箱內(或疫苗運輸箱)，放入冰排，然后以柔軟物質填充，并密封，由專人(2人)運送，不得郵寄，最好使用專車。
采集的標本若不能在24小時內送達，則應盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的，需在4℃冰箱短時間暫存，并盡快聯(lián)系遞送標本。流感病毒在-20℃～-40℃時不穩(wěn)定，故長期保存最好在-70℃溫度以下進行。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
細胞BCL2蛋白表達流式細胞儀檢測試劑盒
載玻片細胞BCL2蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒
冰凍切片組織BCL2蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒
石蠟切片組織BCL2蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒
載玻片細胞BCL2蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒
小鼠胰α(AMY2A)elisa ，英文名： AMY2A ELISA Kit
小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA檢測試劑盒MouseLactoferrin,LTF/LFELISAkit 96T/48T
人甲狀旁腺激素1-34(PTH 1-34)免疫試劑盒 Human Parathyroid hormone1-34,PTH 1-34 ELISA Kit
Ratbeta-siteAPP-cleavingenzyme2,BACE2ELISAKit大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)elisa規(guī)格：96T/48T
[α32P]dCTP聚合酶標記法酶切產(chǎn)物處理試劑盒20次
MouseAquaporin4,AQP-4elisa小鼠水通道蛋白4(AQP-4)elisa規(guī)格：96T/48T
全蛋白提取試劑盒(中)小鼠血管生成素樣蛋白3(ANGPTL3)elisa檢測試劑盒
小鼠血管生成素樣蛋白2(ANGPTL2)elisa檢測試劑盒
小鼠血管生成素樣蛋白1(ANGPTL1)elisa檢測試劑盒
小鼠血管生成素Ⅱ(ANGⅡ)elisa檢測試劑盒
小鼠血管生成素4(ANGPT4)elisa檢測試劑盒
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。
