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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司

主營(yíng)產(chǎn)品: 進(jìn)口elisa試劑盒,細(xì)胞株,細(xì)胞系,菌種

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原代骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)體系
原代骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)體系
參考價(jià)1123-2851
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
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    經(jīng)銷商
  • 所在地

    上海市

規(guī)格
100ML1123元15 瓶 可售
500ML2851元15 瓶 可售

更新時(shí)間:2024-03-13 15:27:18瀏覽次數(shù):169

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【簡(jiǎn)單介紹】
規(guī)格 100ML、500ML 產(chǎn)品別名 原代骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)體系
貨號(hào) BJ-X2379 用途 僅用于科研、不得用于臨床
原代骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)體系的相關(guān)產(chǎn)品:小鼠胚胎干細(xì)胞CE3(干細(xì)胞庫(kù)保藏)小鼠胚胎干細(xì)胞J1(干細(xì)胞庫(kù)保藏)小鼠胚胎干細(xì)胞D3(干細(xì)胞庫(kù)保藏)小鼠胚胎干細(xì)胞E14TG2A(干細(xì)胞庫(kù)保藏)小鼠胚胎干細(xì)胞Oct4-Neo(干細(xì)胞庫(kù)保藏)小鼠誘導(dǎo)型多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞)OSK-1(干細(xì)胞庫(kù)保藏)小鼠胚胎干細(xì)胞(干細(xì)胞庫(kù)保藏)小鼠胚胎干細(xì)胞G-Olig2(干細(xì)胞庫(kù)保藏)小鼠胚胎干細(xì)胞C57BL/6(干細(xì)胞庫(kù)

原代骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)體系

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

原代骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)體系

100ML、500ML

BJ-X2379

細(xì)胞培養(yǎng)具體步驟:

一、常用設(shè)備

1. 準(zhǔn)備室的設(shè)備

單蒸餾水蒸餾器、雙蒸餾水蒸餾器、酸缸、烤箱、高壓鍋、儲(chǔ)品柜(放置未消毒物品)、儲(chǔ)品柜(放置消毒過(guò)的物品)、包裝臺(tái)。配液室的設(shè)備:扭力天平和電子天平(稱量藥品)、PH計(jì)(測(cè)量培養(yǎng)用液PH值)、磁力攪拌器(配置溶液室攪拌溶液)。

2. 培養(yǎng)室的設(shè)備

液氮罐、儲(chǔ)品柜(存放雜物)、日光燈和紫外燈、空氣凈化器系統(tǒng)、低溫冰箱(-80℃)、空調(diào)、二氧化碳缸瓶、邊臺(tái)(書寫實(shí)驗(yàn)記錄)。

3. 必須放在無(wú)菌間的設(shè)備

離心機(jī)(收集細(xì)胞)、超凈工作臺(tái)、倒置顯微鏡、CO2孵箱(孵育培養(yǎng)物)、水浴鍋、三氧消毒殺菌機(jī)、4℃冰箱(放置serum和培養(yǎng)用液)。

二、無(wú)菌操作

(一)無(wú)菌室的滅菌

1.定期打掃無(wú)菌室:每周打掃一次,先用自來(lái)水拖地、擦桌子、超凈工作臺(tái)等,然后用3‰來(lái)蘇爾或新潔爾滅或0.5%過(guò)氧乙酸擦拭。

2.CO2孵箱(培養(yǎng)箱)滅菌:先用3‰新潔爾滅擦拭,然后用75%酒精擦拭或者0.5%過(guò)氧乙酸,再用紫外燈照射。

3.實(shí)驗(yàn)前滅菌:打開(kāi)紫外燈、三氧殺菌機(jī)、空氣凈化器系統(tǒng)各20-30分鐘。

4.實(shí)驗(yàn)后滅菌:用75%酒精(3‰新潔爾滅)擦拭超凈臺(tái)、邊臺(tái)、倒置顯微鏡的載物臺(tái)。

細(xì)胞培養(yǎng)方法:

01 原代培養(yǎng)操作步驟

原代培養(yǎng)的操作步驟為:取材分離培養(yǎng)。

1)取材:對(duì)于不同的組織有不同的取材方法,但均應(yīng)保持材料的新鮮及嚴(yán)格無(wú)菌。

5.png

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下:

1)傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度,當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí),即可進(jìn)行傳代。

2)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次,左右輕輕搖晃后棄掉。

3)根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的,一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

4)把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察,當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí),再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落,然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化,使用吸頭輕輕吹打,混合均勻,以防消化過(guò)度。

5)吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min

6)棄上清,加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,輕輕吹打混勻,使細(xì)胞均勻分散。

7)用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液,以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)足培養(yǎng)液,搖勻,放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

8)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間,甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

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公司正在出售的產(chǎn)品:

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食管鱗狀細(xì)胞癌 KYSE-180(STR鑒定正確)

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人肝癌細(xì)胞HepG2 (STR鑒定正確)

人熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒

注意事項(xiàng):

1)嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作,所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌,且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上,以免細(xì)胞發(fā)生污染。

2)所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞,對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣,必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

3)胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存,促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用。可根據(jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定,就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

4)消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不,收集到的細(xì)胞數(shù)量少,或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離,這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡,影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

5)細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠,或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀,再加入培養(yǎng)液重懸,這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小,可以提高細(xì)胞活率。

6)吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生,以免損傷細(xì)胞,影響細(xì)胞狀態(tài)(吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生)。

 




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