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細(xì)胞名稱  人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞；NCI-H460 [H460]*
形態(tài)特性  上皮樣 　
生長特性  　貼壁生長
特征特性   NCI-H460細(xì)胞株從一位大細(xì)胞肺癌患者的胸水中建立。 細(xì)胞表達(dá)的p53 mRNA易于檢測，其水平與正常肺細(xì)胞相當(dāng)，未表現(xiàn)出DNA總體結(jié)構(gòu)異常。 角蛋白和波形蛋白纖維染色陽性，神經(jīng)絲三聯(lián)體蛋白陰性。
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%　
傳代方法   消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況  P(139+5)
凍存條件  *培養(yǎng)基+8%DMSO　
支原體檢測  　陰性
STR   Amelogenin:X,Y；CSF1PO:11,12；D13S317:13；D16S539:9；D18S51:13,15；D19S433:14；D21S11:30；D2S1338:17,25；D3S1358:15,18；D5S818:9,10；D7S820:9,12；D8S1179:12；FGA:21,23；TH01:9.3；TPOX:8；vWA:17
同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類
人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞；NCI-H460 [H460]*操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時，用0.25%消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生的細(xì)胞，以0.25％消化成單細(xì)胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線
人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞；NCI-H460 [H460]*注意事項：
1. 接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。
人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞；NCI-H460 [H460]*美國菌種保藏中心， 又稱美國模式菌種收集中心(ATCC)，是位于馬里蘭洲洛克菲勒的一家私營的，非贏利性組織。目前它可以提供各種動植物細(xì)胞、標(biāo)準(zhǔn)品、菌株達(dá)兩萬多種。ATCC成立于1925年，是世界上zui大的生物資源中心，由美國14家生化、醫(yī)學(xué)類行業(yè)協(xié)會組成的理事會負(fù)責(zé)管理，是一家性、非盈利生物標(biāo)準(zhǔn)品資源中心。ATCC向發(fā)布其獲取、鑒定、保存及開發(fā)的生物標(biāo)準(zhǔn)品，推動科學(xué)研究的驗證、應(yīng)用及進(jìn)步 ATCC可以提供以下類別生物標(biāo)準(zhǔn)品：細(xì)胞株（3000多種）；菌株（15000多種）；動植物病毒株（2500多種）以及重組物質(zhì)等。
大鼠Ⅵ型膠原α1(COL6α1)ELISA試劑盒 ，英文名： COL6α1 ELISA Kit

Human pituitary adenylate cyclase activating polypeptide (PACAP) ELISA Kit 人垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISA試劑盒

Goatmajorhistocompatibilitycomplex,MHC/OLAELISAKit 山羊主要組織相容性復(fù)合體(MHC/OLA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforC3aELISAKit大鼠補(bǔ)體片斷3a規(guī)格：48T/96T

細(xì)菌鈣轉(zhuǎn)試劑盒20次

rabbitTestoterone,ISAKit兔子睪同(T)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠花生四烯酸-12-脂加氧酶(ALOX12)ELISA試劑盒 ，英文名： ALOX12 ELISA Kit

人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白δ(C/EBPδ)ELISA檢測試劑盒HumanCCAAT/enhancerbindingproteindeta,C/EBPδELISAKit 96T/48T

大鼠維生素B12(VB12)免疫試劑盒 Rat Vitamin B12,VB12 ELISA Kit

英文名稱RatCA199ELISAKit大鼠胃腸癌標(biāo)志物(CA199)規(guī)格：96T/48T

烘培食物尿素比色法定量檢測試劑盒20次

ELISAKitHO-2人血紅素氧合酶2規(guī)格：48T/96T
人胃泌素(Gasin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

豬分泌型免疫球蛋白A(sIgA)免疫試劑盒 Pig secretory immunoglobulin A,SIgA ELISA Kit

HumanIerleukin12,IL-12/P40ELISAKIT 人白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanneuronalnuclearaoaibody,ANNA-1/HuELISA試劑盒人抗神經(jīng)元核抗體1型/抗Hu抗體(ANNA-1/Hu)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織組蛋白脫乙酰化酶2(HDAC2)活性比色法定量檢測試劑盒20次

HumanFibronectin，FNELISAKit人纖連蛋白(FN)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人鼻咽癌細(xì)胞;CNE-2Z

AGRP Others Mouse 小鼠 AGRP / AgRP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

MEG-01 人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞

MSTO-211H人肺癌細(xì)胞株 Human lung cancer cell line MSTO-211H RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

MIF Protein Human 重組人 MIF / GLIF 蛋白 (His 標(biāo)簽)

人胚肺成纖維細(xì)胞;WI-38 [WI38] 人支氣管成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
人鼻咽癌細(xì)胞;CNE-2Z

AGRP Others Mouse 小鼠 AGRP / AgRP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

MEG-01 人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞

MSTO-211H人肺癌細(xì)胞株 Human lung cancer cell line MSTO-211H RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

MIF Protein Human 重組人 MIF / GLIF 蛋白 (His 標(biāo)簽)

人胚肺成纖維細(xì)胞;WI-38 [WI38] 人支氣管成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞；NCI-H460 [H460]*人內(nèi)殼細(xì)胞(HHirSC)( 5×105 )

人癌細(xì)胞;MCF 7B

CL-0447SW 1353(人骨肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人細(xì)胞;Hela 229 [HeLa229] 大鼠主動脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

P815 小鼠肥大細(xì)胞癌細(xì)胞

PI3 Others Human 人 Elafin / WFDC14 / appin-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)