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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品: 進(jìn)口elisa試劑盒,細(xì)胞株,細(xì)胞系,菌種 |
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更新時(shí)間:2022-09-02 11:51:11瀏覽次數(shù):171
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操作流程:
1待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
2酶標(biāo)板置4℃,包被過(guò)夜。
3洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過(guò)洗一遍將洗滌液注滿(mǎn)板孔后,即甩去,之后將洗滌液注滿(mǎn)板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
4陰性對(duì)照孔每孔加入pbs 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人aif抗體工作液50μl。
5酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
6洗板,同4。
7每孔加1:5000稀釋的hrp-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
8酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
9洗板,同4。
10每孔加tmb顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
11每孔加100μl 2mol/l h2so4終止反應(yīng)。
12分別測(cè)450nm 吸光值w1和630nm吸光值w2,終測(cè)得的od值為兩者之差w1-w2,以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
13數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本s和陰性對(duì)照n的 od值后,計(jì)算s/n值。s/n≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
HBsAb 檢測(cè)試劑盒 | HBsAb ELISA Kit | 48T/96T | BJ-E1944 |
試劑盒組成及試劑配制:
1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國(guó)家明確要求要采用批批檢定的形式對(duì)ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān),我司嚴(yán)格按照進(jìn)行,已獲得國(guó)家承認(rèn)的“三證",每一個(gè)產(chǎn)品都有對(duì)應(yīng)的批號(hào),只要客戶(hù)提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必?fù)?dān)心會(huì)有過(guò)期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準(zhǔn)備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來(lái),在室溫下放置20-30 min后,再進(jìn)行測(cè)定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度,以滿(mǎn)足后面的測(cè)定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類(lèi)風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類(lèi)風(fēng)濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測(cè)抗原時(shí),可用加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解。
ELISA 試驗(yàn)時(shí),注意事項(xiàng)如下:
1. 正式試驗(yàn)時(shí),應(yīng)分別以陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,說(shuō)明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽(yáng)性標(biāo)本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見(jiàn)酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法"(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無(wú)色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿(mǎn)意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。
土壤纖維素酶(S-CL)測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/24樣 4-Amino-3-hydroxybenzoic acid 2374-03-0 中文名:4-氨基-3-羥基苯甲酸 分子式:C7H7NO3 度:98.0%
土壤無(wú)機(jī)0(S-PHOS)含量測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣 4-Amino-3-hydroxy-1-naphthalenesulfonic acid 116-63-2 中文名:4-氨基-3-羥基-1-萘磺酸 分子式:C10H9NO4S 度:98.0%
土壤無(wú)機(jī)0(S-PHOS)含量測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/24樣 4-Aminoantipyrine 中文名:4-氨基林 分子式:C11H13N3O 度:99.0%
土壤脫氫酶(SDHA)測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/24樣 4-Aminoantipyrine 中文名:4-氨基林 分子式:C11H13N3O
土壤酸性試劑盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/24樣 4-Amino-2,5-dimethoxy-N-phenylbenzenesulphonamide 中文名:4-氨基-2,5-二甲氧基-N-苯基苯磺酰胺 分子式:C14H16N2O4S 度:99.0%
E-64d,抑制劑,阿洛司他丁 E64d,E-64d 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Ratplatelet-derivedgrowthfactor,PDGF大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)試劑盒
2’-脫氧胞苷-5‘-二鈉鹽 dCMP,2Na 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR GST融合蛋白陽(yáng)性表達(dá)點(diǎn)狀印跡篩選試劑盒10
dAMP;2’-脫氧腺苷-5‘-單 2'-Deoxyadenosine 5'-monophosphate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR Mousethyroxine,T4試劑盒小鼠甲狀腺素(T4)試劑盒
黃素腺嘌呤二核苷酸二鈉鹽 FAD-Na2 質(zhì)量規(guī)格:BR,羅氏進(jìn)分 小鼠抗(AT)試劑盒 ,英文名: AT
GTP;鳥(niǎo)苷-5‘-三鈉鹽 GTP, 3 Salt 質(zhì)量規(guī)格:>90%,分子生物學(xué)級(jí) 人花生四烯酸5脂加氧酶(ALOX-5)檢測(cè)試劑盒Humanarachidonate5-lipoxygenase,ALOX-5
-5’-二鈉鹽 5-IMP,2Na 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)試劑盒 Rat heme oxygenase 2,HO-2
尿苷-5’-二鈉鹽(UDP) Uridine 5'-diphosphate salt from 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 英文名稱(chēng)RatLaminaPropriaLymphocyte大鼠脂蛋白脂酶(LPL)
5’-尿苷酸二鈉(UMP) 5'-UMP-Na2 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 高多糖多酚植物組織葉綠體DNA高分離試劑盒10/20
dAMP-Na2;脫氧腺苷二鈉 2-Deoxyadenosine-5-Monophosphate Di salt(dAMP-Na2) 質(zhì)量規(guī)格:>98,BR F-TESTO人游離睪同規(guī)格:48T/96T
ATP.Na2; 腺苷-5’-三二鈉鹽水合物 5'-ATP-Na2 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng),三水合物 小鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)試劑盒 ,英文名: AECA
魚(yú)白介素8(IL-8/CXCL8)elisa分析檢測(cè)試劑盒
HBsAb 檢測(cè)試劑盒小鼠草胺膦乙酰轉(zhuǎn)移酶(PAT)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠草胺膦乙酰轉(zhuǎn)移酶(PAT)elisa分析檢測(cè)試劑盒
小鼠不對(duì)稱(chēng)二甲基(ADMA)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠不對(duì)稱(chēng)二甲基(ADMA)elisa分析檢測(cè)試劑盒
小鼠補(bǔ)體因子H(CFH)elisa檢測(cè)試劑盒
注:本公司提供試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)。需要其他Elisa試劑盒請(qǐng)咨詢(xún)銷(xiāo)售人員。產(chǎn)品僅用于科研