上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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細(xì)胞名稱 幼蚊細(xì)胞;C6/36說明書
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 C6/36細(xì)胞建系于1978年(Igarashi. A),后經(jīng)過多次克隆。細(xì)胞生長狀態(tài)穩(wěn)定,可成功用于多種病毒的增殖。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C123
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR STR 鑒定
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
幼蚊細(xì)胞;C6/36說明書冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
幼蚊細(xì)胞;C6/36說明書細(xì)胞傳代培養(yǎng)
一、原理 細(xì)胞在培養(yǎng)瓶長成致密單層后,已基本上飽和,為使細(xì)胞能繼續(xù)生長,同時(shí)也將細(xì)胞數(shù)量擴(kuò)大,就必須進(jìn)行傳代(再培養(yǎng))。 傳代培養(yǎng)也是一種將細(xì)胞種保存下去的方法。同時(shí)也是利用培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)的必經(jīng)過程。懸浮型細(xì)胞直接分瓶就可以,而貼壁細(xì)胞需經(jīng)消化后才能分 瓶。
二、材料和試劑 1、細(xì)胞:貼壁細(xì)胞株 2、試劑:0.25%、1640培養(yǎng)基(含10%小牛血清) 3、儀器和器材:倒置顯微鏡,培養(yǎng)箱、培養(yǎng)瓶、吸管、廢液缸等
三、操作步驟 1、將長滿細(xì)胞的培養(yǎng)瓶中原來的培養(yǎng)液棄去。 2、加入0.5—1ml 0.25%溶液,使瓶底細(xì)胞都浸入溶液中。 3、瓶口塞好橡皮塞,放在倒置鏡下觀察細(xì)胞。隨著時(shí)間的推移,原貼壁的細(xì)胞逐漸趨于圓形,在還未漂起時(shí)將棄去,加入10ml培養(yǎng)液終止消化。 觀察消化也可以用肉眼,當(dāng)見到瓶底發(fā)白并出現(xiàn)細(xì)針孔空隙時(shí)終止消化。一般室溫消化時(shí)間約為1—3分鐘。 4、用吸管將貼壁的細(xì)胞吹打成懸液,分到另外兩到三瓶中,實(shí)踐培養(yǎng)液塞好橡皮塞,置37℃下繼續(xù)培養(yǎng)。第二天觀察貼壁生長情況。 附:消化液配制方法: 稱取0.25克蛋白酶(活力為1:250),加入100ml無Ca2+、Mg2+的Hank’s液溶解,濾器過濾除菌,4℃保存,用前可在37℃下回溫。 溶液中也可加入EDTA,使zui終濃度達(dá)0.02%。
唐松草Meadowrue Thalrugosaminine 皺唐松草寧堿 22226-73-9 C39H44N2O7 ≥95%
蕓苔速內(nèi)酯Brcssinolidq796-43-720mg
賣角甾淳;賣角固淳 1957-7-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
對照品130527-200201含量測定
豆甾醇;豆固醇 Stigmasterol 201-482-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
牡丹皮 Coex Moan 1g
野靛減Cytisine482-32-8HPLC≥98%,20mg/vial
Mollugin 大葉茜草素 55481-88-4
麝香酮541-91-3Muscone
五味子乙素 Schizandrin B 61281-37-6 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
當(dāng)藥Sweiae Herba Sweianin 當(dāng)藥寧 20882-75-1 C14H10O6 ≥98%
各緦LuoSiHPLC≥98%;20mg/支
槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龍膽雙糖苷 Quercetin-3-O-b-D-glucose-7-O-b-D-gentiobiosiden 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
HPLC法含量測定本甲利扎曲普坦100793-200501常溫,避光100mg
Mesorid Besylate本磺酸美索達(dá)嗪標(biāo)準(zhǔn)品32672-69-8 250mg
IL20RB Others Rat 大鼠 IL20RB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
原代內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml
大鼠子宮平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CHO-K1倉鼠卵巢細(xì)胞亞株 CHO-K1 Chinese hamster ovary cell subline F-12K+10%FBS
胰島素樣生長因子
E.G7-OVA(小鼠T淋巴瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人卵巢成纖維細(xì)胞HOF
小鼠垂體瘤細(xì)胞(分泌促生長激素分泌激素);AtT-20
CL-0009769-P(人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
PRSS8 Others Mouse 小鼠 Prostasin / PRSS8 (aa 30-289) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
B16-F10, 小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞 皮膚黑色素瘤細(xì)胞,SK-HEL-1細(xì)胞 HCCLM3(肝癌細(xì)胞)
大鼠骨髓瘤細(xì)胞;Y3-Ag 1.2.3
FCGR1 Others Human 人 CD64 / FCGR1A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
幼蚊細(xì)胞;C6/36說明書人心肌細(xì)胞-RNAHCM-a miRNA5 μg
HEPACAM2 Others Rat 大鼠 HepaCAM2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人心肌成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
PC-12細(xì)胞,大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(高分化) HT-29(結(jié)腸癌細(xì)胞) 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;HEC-1-B
CXCL12 Protein Human 重組人 CXCL12 / SDF1b 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
SVEC4-10(小鼠淋巴結(jié)內(nèi)皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 CCL2 / MCP-1 / MCP1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
幼蚊細(xì)胞;C6/36說明書注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請拍下照片及時(shí)和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。