上海邦景實業有限公司
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白鮮皮PCR鑒定試劑盒特點
2022-1-5 閱讀(124)
本產品包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液,濃度為2×。具有快速簡便、靈敏度高、特異性強、穩定性好等優點,可大限度的減少人為誤差。使用時只需加入DNA模板和引物既可。使用方便快捷,能避免PCR操作過程中的污染,使用時只需取適量2×TaqPCR MasterMix溶液,加入模板和引物,并加入去離子水補足體積,使MasterMix溶液濃度為1×即可進行反應。使用前請保證充分溶解并混勻,操作需在冰上進行。本產品就是為此目的根據 PCR 原理開發的試劑盒。具有高靈敏度、高特異性、高穩定性特點。
1、PCR反應的特異性
決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區,其特異性程度就更高。
2、靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
3、 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
4、對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。