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上海邦景實業有限公司
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你知道進口elisa試劑盒的檢測方法嗎?
2020-4-20 閱讀(359)
進口elisa試劑盒既可以直接溶解在水里面也可以溶解在溶劑里面.使用很方便,用于防銹油(脂)類產品中,對銅及其合金,銀及其合金的防腐蝕效果特別明顯,多用于銅及銅合金的氣相緩蝕劑,循環水處理劑,汽車防凍液,照相防霧劑,高分子穩定劑,植物生長調節劑,潤滑油添加劑等。接下來,我們來介紹進口elisa試劑盒的兩種檢測方法及其具體操作流程。
一、進口elisa試劑盒的兩種檢測方法
1、用于檢測未知抗體的間接法
(1)用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜;
(2)次日洗滌3次;
(3)加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌;
(4)(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml;
(5)37℃孵育30-60分鐘,洗滌;
(5)zuihou一遍用DDW洗滌。
二、用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法
(1)包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。
(2)加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
(3)加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。
(4)加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
(5)終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
(6)結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。