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微生物培養基配置步驟及注意事項
2024-4-28 閱讀(55)
培養基( culture medium)是人工配制的，適合微生物生長、分離鑒別的營養基礎。一般基礎培養基中古有蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉、氯化鈉、瓊脂等基本營養物質。微生物培養基應用范圍很廣。例如，無菌試驗培養基可檢查藥品、生物制品是否污染細菌，它直接關系到人民用藥安全；在臨床及食品衛生檢驗中常用選擇、鑒別培養基，此類培養基中根據用途不同，需要加入抑菌劑、指示劑、血液、糖等試劑，以利于特定細菌的分離與鑒別，需要使細菌大量生長、繁殖的各類培養基；病毒培養及疫苗中則需用組織細胞培養液，主要成分為多種氨基酸、核苷酸、無機鹽、生長因子等。配置微生物培養基需要
配置微生物培養基步驟：
1、準確稱量試劑：根據不同的菌類和用途，選擇適宜的培養基，培養基所需試劑必須純凈。
2、校正pH值：將稱量好的培養基各種成分放入容器內，標記劃線，加熱溶解，補充水分，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計測定。用1NNaOH和1N HCl調節pH值到適宜范圍內。
3、過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養基倒入其中過濾至透明。
4、分裝：將過濾后的培養基分裝于中試管或三角瓶內(試管內每支裝5mL;三角瓶中裝100～150ml)，塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準備滅菌。
5、滅菌：培養基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養細胞在水中煮沸后即被殺死，但細菌的芽胞有較強的抗熱性，須經高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質易于凝固變性，因為蒸汽的穿透力強，殺菌效果好。
配置微生物培養基注意事項：
1、根據不同微生物的營養需要配制不同的培養基。
2、注意各種營養物質的濃度及合適配比，保持合適滲透壓。
3、將培養基的 pH 控制在適宜的范圍之內，以利于不同類型微生物的生長繁殖或代謝產物的積累。
4、要注意各種原料的配比，每種培養基的配比合適的配比，可以按照老師的要求去做。
5、如需要加熱的時候注意時間的把握。
