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ELISA捕獲法測IgM抗體操作步驟

2023-5-8  閱讀(64)

  血清中針對某些抗原的特異性IgM常和特異性IgG同時存在,后者會干擾IgM抗體的測定。因此測定IgM抗本多用捕獲法,先將所有血清IgM(包括異性IgM和非特異性IgM)固定在固相上,在去除IgG后再測定特異性IgM。操作步驟如下:

1、將抗人IgM抗體連接在固相載體上,形成固相抗人IgM。洗滌。

2、加入稀釋的血清標本:保溫反應后血清中的IgM抗體被固相抗體捕獲。洗滌除去其他免疫球蛋白和血清中的雜質成分。

3、加入特異性抗原試劑:它只與固相上的特異性IgM結合。洗滌。

4、加入針對特異性的酶標抗體:使之與結合在固相上的抗原反應結合。洗滌。

5、加底物顯色:如有顏色顯示,則表示血清標本中的特異性IgM抗體存在,是為陽性反應。



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