上海邦景實業(yè)有限公司
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PCR反應(yīng)技術(shù)特點
2022-11-23 閱讀(244)
聚合酶鏈式反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction,PCR)是一項利用 DNA 雙鏈復(fù)制原理,在生物體外復(fù)制特定 DNA 片段的的核酸合成技術(shù)??稍诙虝r間內(nèi)大量擴增目的 DNA 片段,而不必依賴大腸桿菌或酵母菌等生物體。
1、靈敏度高
PCR 產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg = 10-12)量級的起始待測模板擴增到微克(μg=-6)水平。能從 100 萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR 的靈敏度可達 3 個 RFU(空斑形成單位);在細菌學(xué)中最小檢出率為 3 個細菌。
2、特異性強
PCR 反應(yīng)的特異性決定因素:
引物與模板 DNA 特異正確的結(jié)合;
堿基配對原則;
Taq 聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
靶基因的特異性與保守性。
3、簡便、快速
只需要一次性將反應(yīng)液加好后,就可以進行擴增。一般 2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
4、純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及 RNA 均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗漱液、毛發(fā)、細胞、活組織等 DNA 擴增檢測。