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大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶 TRACP 酶聯免疫試劑盒

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更新時間:2017-08-15 16:11:04瀏覽次數:262次

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大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶 TRACP 酶聯免疫試劑盒用純化的待測物質抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入待測物質,再與HRP標記的待測物質抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。

大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶 TRACP 酶聯免疫試劑盒【工作原理】
TRACP,抗酒石酸酸性磷酸酶。TRACP是由骨吸收的破骨細胞和有活力的巨噬細胞所釋放的。在血液循環中的TRACP有TRACP5b和TRACP5a兩種形式,TRACP5b來源于破骨細胞,而TRACP5a來源于巨噬細胞。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯免疫吸附測定試劑盒(ELISA)。預先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體,經*(biotin)標記。樣品和*標記抗體先后加入酶標板孔反應后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應;經過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關。

大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶 TRACP 酶聯免疫試劑盒【注意事項】
1. 從-20℃取出的試劑盒,在4℃解凍過夜。盒內每一瓶解凍的溶液在開啟瓶蓋之前都要輕輕搖勻,避免解凍時出現的分層,否則會出現濃度不均一的現象。
2. 開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。
3. 配制各種試劑時,切記混勻!
4. 用戶在初次使用試劑盒時,應將各種試劑管離心數分鐘,以便試劑集中到管底。
5. 建議所有大鼠TRACP標準品、樣本都做雙份檢測。
6. 要嚴格避免操作過程中酶標板干燥。干燥會使酶標板上生物成份迅速失活!
7. 為免交叉污染,要避免重復使用手中的吸頭和試管。

【洗板方法】
手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將*的PBS或TBS洗滌緩沖液至少0.35ml注入孔內,浸泡1-2分鐘。根據需要,重復此過程數次。
自動洗板:如果有自動洗板機,應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。

【樣品的準備和保存】
樣品如果不立即分析,應分裝后冷凍保存,且避免反復凍融。
血清——用干凈試管收集血液,室溫凝固2小時或4℃過夜,離心1000×g 10分鐘,收集血清。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。
細胞培養、組織勻漿、體液——離心去除沉淀,立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。

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