人5-核苷酸酶酶聯(lián)免疫試劑盒【工作原理】
5-核苷酸酶（5—NT）是一種特殊的磷酸酯水解酶，廣泛分布于肝、膽、胰、腸、心、腦、腎、垂體、甲狀腺……等臟器和組織中，在肝內(nèi)主要存在于膽小管和竇狀間隙內(nèi)。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒（ELISA）。預(yù)先包被的人5’-核苷酸酶抗體為單克隆人5’-核苷酸酶抗體，檢測(cè)相人5’-核苷酸酶抗體為多克隆人5’-核苷酸酶抗體，經(jīng)*（biotin）標(biāo)記。樣品和*標(biāo)記人5’-核苷酸酶抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后，PBS或TBS洗滌。隨后加入過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng)；經(jīng)過(guò)PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測(cè)因子呈正相關(guān)。
人5-核苷酸酶酶聯(lián)免疫試劑盒【每套試劑盒中內(nèi)容】(96T)
材料 數(shù)量
人5’-核苷酸酶標(biāo)準(zhǔn)品 96T(2vial)
預(yù)包被人5’-核苷酸酶抗體的96孔板 96T（8×12）
*標(biāo)記人5’-核苷酸酶抗體 96T (1:100)
ABC（親和素-過(guò)氧化物酶復(fù)合物） 96T (1:100)
樣品稀釋液 96T×2
人5’-核苷酸酶抗體稀釋液 96T×1
ABC稀釋液 96T×1
TMB顯色液A 96T×1
TMB顯色液B 96T×1
TMB終止液 96T×1
ELISA洗滌液 96T×1(1:25)
【需要而未提供的試劑和器材】
1． 37℃恒溫箱。
2． 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。
3． 自動(dòng)洗板機(jī)。
4． 單通道或多通道可調(diào)節(jié)移液器以及其吸頭。
5． 蒸餾水，容量瓶等
6． 干凈的試管和Eppendof管。
【注意事項(xiàng)】
1． 從-20℃取出的試劑盒，在4℃解凍過(guò)夜。盒內(nèi)每一瓶解凍的溶液在開啟瓶蓋之前都要輕輕搖勻，避免解凍時(shí)出現(xiàn)的分層，否則會(huì)出現(xiàn)濃度不均一的現(xiàn)象。
2． 開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。
3． 配制各種試劑時(shí)，切記混勻！
4． 用戶在初次使用試劑盒時(shí)，應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘，以便試劑集中到管底。
5． 建議所有人5’-核苷酸酶標(biāo)準(zhǔn)品、樣本都做雙份檢測(cè)。
6． 要嚴(yán)格避免操作過(guò)程中酶標(biāo)板干燥。干燥會(huì)使酶標(biāo)板上生物成份迅速失活！
7． 為免交叉污染，要避免重復(fù)使用手中的吸頭和試管。
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