人血管內皮細胞生長因子A(VEGF-A)酶聯免疫試劑盒【工作原理】
VEGF-A,血管內皮細胞生長因子A。VEGF家族包括 6種亞型:VEGF - A、VEGF - B、VEGF - C、(VEGF - D、VEGF - E以及胎盤生長因子 placental growth factor,)PGF ,序列呈高度同源性。VEGF - A發現zui早 ,故多數文獻中的 VEGF即指 VEGF - A。1989年由 Ferrara等人從牛垂體的濾泡星狀細胞中提取。人體多種組織細胞中均有不同程度表達。人類 VEGF - A基因定位于 6號染色體的短臂1區 2帶 6p21 ,全長 28 kb,其中編碼基因長約 14 kb,由 8個外顯子和 7個內含子組成 ,經剪接后形成 6種單體 ,根據氨基酸數目命名為 VEGF121、VEGF145、VEGF165、VEGF189 、VEGF206以及 VEGF115。外顯子 1~5編碼被 VEGF - A受體識別的結構域。外顯子 6和 7編碼肽段的存在與否是 VEGF - A各單體的主要區別。各單體功能上的差異主要是它們與細胞表面和細胞外基質中肝素的親和力不同。提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯免疫吸附測定試劑盒(ELISA)。預先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體,經*(biotin)標記。樣品和*標記抗體先后加入酶標板孔反應后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應;經過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關。
人血管內皮細胞生長因子A(VEGF-A)酶聯免疫試劑盒【每套試劑盒中內容】(96T)
材料 數量
人VEGF-A標準品 96T(2vial)
預包被人VEGF-A抗體的96孔板 96T(8×12)
*標記人VEGF-A抗體 96T (1:100)
ABC(親和素-過氧化物酶復合物) 96T (1:100)
樣品稀釋液 96T×2
人VEGF-A抗體稀釋液 96T×1
ABC稀釋液 96T×1
TMB顯色液A 96T×1
TMB顯色液B 96T×1
TMB終止液 96T×1
ELISA洗滌液 96T×1(1:25)
【需要而未提供的試劑和器材】
1. 37℃恒溫箱。
2. 標準規格酶標儀。
3. 自動洗板機。
4. 單通道或多通道可調節移液器以及其吸頭。
5. 蒸餾水,容量瓶等
6. 干凈的試管和Eppendof管。