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人腫瘤壞死因子α(TNFα)酶聯(lián)免疫試劑盒

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更新時間:2017-08-18 15:40:24瀏覽次數(shù):136次

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人腫瘤壞死因子α(TNFα)酶聯(lián)免疫試劑盒用純化的待測物質抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入待測物質,再與HRP標記的待測物質抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。

人腫瘤壞死因子α(TNFα)酶聯(lián)免疫試劑盒【工作原理】
Tumor necrosis factor α,TNFα,腫瘤壞死因子α。TNFα前體是以跨膜蛋白的形式存在于細胞內,在細胞外被剪切成17KDa的成熟形態(tài)(157個氨基酸)。活性的TNFα以非共價鍵二聚體、三聚體甚至五聚體的形式存在,但在SDS-PAGE顯示為單一17KDa條帶。很多細胞都能合成TNFα,包括各種免疫細胞(單核細胞、巨噬細胞、T、B細胞、粒細胞、NK細胞)和非免疫細胞(上皮細胞、纖維細胞、肌細胞、Kuppfer細胞等)。TNFα的合成受到很多因素的影響。其生理功能zui早認為是有抗腫瘤活性,現(xiàn)在已明確不僅能調節(jié)腫瘤細胞的生長,對很多細胞的生長、分化和代謝都有影響。TNFα是免疫宿主反應的快速反應因子。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(ELISA)。預先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)*(biotin)標記。樣品和*標記抗體先后加入酶標板孔反應后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應;經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關。
人腫瘤壞死因子α(TNFα)酶聯(lián)免疫試劑盒【每套試劑盒中內容】(96T)

材料 數(shù)量
人TNFα標準品 96T(2vial)
預包被人TNFα抗體的96孔板 96T(8×12)
*標記人TNFα抗體 96T (1:100)
ABC(親和素-過氧化物酶復合物) 96T (1:100)
樣品稀釋液 96T×2
人TNFα抗體稀釋液 96T×1
ABC稀釋液 96T×1
TMB顯色液A 96T×1
TMB顯色液B 96T×1
TMB終止液 96T×1
ELISA洗滌液 96T×1(1:25)

人腫瘤壞死因子α(TNFα)酶聯(lián)免疫試劑盒【需要而未提供的試劑和器材】
1. 37℃恒溫箱。
2. 標準規(guī)格酶標儀。
3. 自動洗板機。
4. 單通道或多通道可調節(jié)移液器以及其吸頭。
5. 蒸餾水,容量瓶等
6. 干凈的試管和Eppendof管。

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