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上海研伴實業有限公司
人結直腸癌氟*耐藥株細胞
Human Colorectal Cancer Fluorouracil Resistant Strains
貨號:HCT-8/FU
價格:¥1500.0
規格: 1*10?6?
細胞介紹
這是一株耐藥細胞株。
細胞特性
1)來源:人結腸癌
2)形態:上皮細胞樣
3)含量:>1x106 個/mL
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
人結直腸癌氟*耐藥株細胞
Human Colorectal Cancer Fluorouracil Resistant Strains
貨號:HCT-8/FU
價格:¥1500.0
規格: 1*10 6
細胞介紹
這是一株耐藥細胞株。
人結直腸癌氟*耐藥株細胞細胞特性
1)來源:人結腸癌
2)形態:上皮細胞樣
3)含量:>1x106 個/mL
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
人結直腸癌氟*耐藥株細胞運輸和保存:可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式:(1)干冰運輸,收到后立即轉入液氮凍存或直接復蘇;(2)存活細胞,收到后應繼續生長,傳代達到細胞生長狀態良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。
細胞用途:僅供科研使用。
細胞培養步驟
一.培養基及培養凍存條件準備:
注意:客戶收到細胞后按照下面的要求操作:培養瓶里面的培養液是不含藥物的。待細胞長到 70-80%的匯合度時,去掉培養液,加入含 8000ng/ml FU 藥物的培養液,放入培養箱,這段時間肯定會有小部分細胞懸浮起來,但是不要緊,通過換液可以去掉,下面的細胞待長滿就可以消化傳瓶了,這時可以一直用含
藥培養液來消化培養細胞,一兩代之后可以將藥物濃度提高到 15000ng/ml,含藥培養液用于細胞培養都沒問題的,凍存的時候就不要在凍存液里面加藥物了。
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022,添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%,添加1%雙抗,15000ng/ml 氟*。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
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