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上海研伴實業有限公司
人腎胚瘤細胞
Renal Neoplasms
貨號:G-401
價格:¥1350.0
規格: 1*10?6?
細胞介紹
G-401細胞來源于韋爾姆斯氏瘤,該細胞表達成腎細胞生長因子。
人腎胚瘤細胞
Renal Neoplasms
貨號:G-401
價格:¥1350.0
規格: 1*10 6
人腎胚瘤細胞細胞介紹
G-401細胞來源于韋爾姆斯氏瘤,該細胞表達成腎細胞生長因子。
人腎胚瘤細胞細胞特性
1) 來源:腎臟
2) 形態:上皮細胞樣,貼壁生長
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規格:T75瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存:使用T25瓶充液發送活細胞。收到細胞后,請先在顯微鏡下檢查細胞生長狀態,并將T25瓶置于培養箱約6h或過夜后,再次檢查細胞狀態。若狀態良好,可按照以下細胞培養步驟進行細胞后續處理操作。若發現可疑污染物,請及時與我們取得。
細胞用途:僅供科研使用。
細胞培養步驟
一.培養基及培養凍存條件準備:
1) 準備McCOY's 5A培養基(McCOY's 5A,SIGMA,貨號M4892,添加NaHCO3 2.2g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
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