犬ELISA試劑盒用于測定血清、血漿及相關液體樣本中的含量。如需更多Elisa試劑盒產品,請來電詳詢。試劑盒嚴格按照說明書的操作進行,試劑不同批號組分不得混用。
在犬ELISA試劑盒科研實驗中我們需要注意一些實驗誤差的問題,下面就是為實驗減少誤差的具體操作步驟:
1.實驗使用前,將所有試劑充分搖勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免在實驗加樣時加入大量的氣泡,實驗時在加樣上產生誤差。
2.根據待檢測樣品的數量加上標準品的數量決定所需要使用的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品需根據自己的數量來定,如在實驗中能使用復孔的則盡量做復孔。
3.將稀釋好后的標準品50ul加入反應孔、并加入待測樣品50ul在反應孔內。立即加入50ul的*標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩使其均勻,在37℃的條件下溫育1小時。
4.以上實驗結束后即甩去孔內的液體,每孔均加滿洗滌液,振蕩30秒后,甩去孔內的洗滌液,用吸水紙拍干。重復操作3次即可。如果用洗板機洗滌,洗滌次數則需增加一次。
5.在每孔中加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩使其搖勻,在37℃的條件下溫育30分鐘。
6.將孔內的液體甩去,將每個孔中加滿洗滌液,振蕩30秒后,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
7. 將每個孔中均加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩搖勻,在37℃的條件下溫育10分鐘。注意:避免光照。
8.在取出酶標板時,即迅速加入50ul終止液,加入終止液后立即測定結果。
9.zui后即在450nm波長處測定各孔的OD值。
使用說明書樣品收集、處理及保存方法:
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。