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本產品僅供科學實驗研究使用! 不能用于臨床或動物診斷！

細胞簡介：

小鼠直腸平滑肌分離自直腸組織；直腸為大腸的未段，位于小骨盆內。上端平第3骶椎處接續乙狀結腸，沿骶骨和尾骨的前面下行，穿過盆膈，下端以而終。直腸上端的大小似結腸，其下端擴大成直腸壺腹，是糞便排出前的暫存部位，下端變細接肛管。直腸在盆腔內的位置與骶椎腹面關系密切，與骶椎有相同的曲度。直腸周圍多脂肪、無縱帶，位于膀胱和生殖器官的背側。直腸平滑肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。直腸的動脈血供主要是來自腸系膜下動脈的直腸上動脈，來自髂內動脈的直腸中動脈和來自髂內動脈的直腸下動脈。平滑肌收縮是胃腸蠕動中基本的運動方式；腸炎時由于平滑肌特殊肌動蛋白的增加導致了平滑肌層的增厚。平滑肌肌動蛋白可能影響收縮力的產生，這進一步證明了炎癥時的腸平滑肌細胞具有可塑性。利用腸平滑肌細胞的培養，可以幫助了解收縮、增殖和胃腸道結締組織對平滑肌細胞的反應。

原代細胞培養條件：

?溫度?：通常在37℃下進行，以模擬體內溫度。

?pH值?：培養液的pH值應保持在7.2~7.4之間，以維持細胞的正常生理狀態。

?氣體環境?：在含有5% CO2的培養箱中進行，以促進細胞生長。

?培養基?：使用含有適當營養成分的培養基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無菌操作?：整個培養過程需要在無菌條件下進行，以防止污染。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠直腸平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠直腸平滑肌采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細胞培養的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動物組織從機體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個細胞。

?細胞計數?：使用血細胞計數器或其他方法對細胞進行計數，確保細胞密度適中。

?接種培養?：將細胞懸液接種到培養瓶中，加入適量的培養基，置于37℃、5% CO2的培養箱中培養。

?換液和傳代?：定期更換培養液，當細胞達到一定密度時進行傳代培養，以維持細胞的生長狀態。

原代細胞的4種培養方法：

　　① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　?、?懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

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　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用

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