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原代細(xì)胞VS細(xì)胞系：

用酶或機(jī)械方法直接從人或動(dòng)物組織中分離出來的細(xì)胞。嚴(yán)格來說，從機(jī)體分離出來到傳代之前的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞，絕大部分的原代細(xì)胞在體外可以分裂10-15次(這與細(xì)胞的端粒長短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞。

?小鼠牙齦成纖維細(xì)胞

商品屬性：

細(xì)胞簡介：

小鼠牙齦成纖維分離自牙齦組織；牙齦是附著在牙頸和牙槽突部分的粘膜組織，呈粉紅色、有光澤、質(zhì)堅(jiān)韌。牙齦邊緣稱為齦緣，正常呈月芽形。齦緣與牙頸之間的小溝稱齦溝。兩鄰牙之間的牙齦突起稱齦乳突。也叫齒齦，通稱牙床；是指包住齒頸的黏膜組織，粉紅色，內(nèi)有很多血管和神經(jīng)。牙齦表面為復(fù)層鱗狀上皮，有角化層或不全角化層。上皮釘較長，伸入結(jié)締組織。牙齦上皮不僅覆蓋牙齦外露部分，而且也轉(zhuǎn)向內(nèi)側(cè)，覆蓋齦溝壁稱為溝內(nèi)上皮；一部分附著在牙體上稱為結(jié)合上皮。牙齦的固有層為各種方向交織的結(jié)締組織纖維束，其中主要的成分是膠原纖維，它占全部結(jié)締組織56%。牙齦中為數(shù)多的細(xì)胞為成纖維細(xì)胞，肥大細(xì)胞也常在牙齦中出現(xiàn)，此外還有淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠牙齦成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠牙齦成纖維采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞一般傳至10代左右，大部分細(xì)胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過“危機(jī)"而繼續(xù)傳下去，存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代，叫細(xì)胞株。當(dāng)50代以后又會出現(xiàn)“危機(jī)"，這時(shí)有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn)，從而可能無限制地傳代下去，稱為細(xì)胞系。

也有認(rèn)為細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。由此便引申出了后來的有限細(xì)胞系、無限細(xì)胞系，因此，細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞，廣義是指可傳代的細(xì)胞。而細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的單一細(xì)胞稱為細(xì)胞株。

細(xì)胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價(jià)格便宜、無限傳代等優(yōu)點(diǎn)，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯(cuò)誤鑒定及交叉污染的問題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長因子4(bFGF-4)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human bactericidal / permeability increasing protein (BPI) ELISA Kit 人殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)ELISA試劑盒

Humanpokeweedmitogen,PWMELISAKit 人美洲商陸素(PWM)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-epidemichemorrhagicfevervirusIgGaibody,EHFIgGELISA試劑盒人抗流行性出血熱病毒抗體IgG(EHF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物結(jié)構(gòu)域重排甲基轉(zhuǎn)移酶(DomaiearrangedMethylase;DRM)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20次

HumanVitaminK1，VK1ELISAKit人K1(VK1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠促黃體生成激素(mouse LH)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

小鼠(mouse Lysozyme)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

小鼠巨嗜細(xì)胞趨化蛋白-1(mouse MCP-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

小鼠MCP-3(mouse MCP-3)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

大鼠白介素23(IL-23)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-23 ELISA Kit

Mouse leukocyte differeiation aigen 30 (CD30) ELISA Kit 小鼠白細(xì)胞分化抗原30(CD30)ELISA試劑盒

ELISA 小鼠IgM(mouse IgM) 48T/96T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforIL-8/CXCL8(Mouseierleukin8)ELISAKit小鼠白介素8規(guī)格：48T/96T

通用型海鳥彎曲桿菌(Campylobacterlaridis)試劑盒20次

ELISAKitAch大鼠乙酰規(guī)格：48T/96T

PDPN重組小鼠 Podoplanin / PDPN 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

CD68 CD68抗原 0.5mgCD68 CD68抗原

PTPRA重組人 PTPRA / PTPalpha 蛋白 (aa 174-793, His & GST 標(biāo)簽) Protein

ENO1 Protein Human 重組人 ENO1 / Enolase 1 / alpha-enolase 蛋白 (His 標(biāo)簽)

AHSG Protein Mouse 重組小鼠 Fetuin-A / AHSG 蛋白 (His 標(biāo)簽)

小鼠牙齦成纖維細(xì)胞CD68 CD68抗原 0.5mgCD68 CD68抗原

ENO1 Protein Human 重組人 ENO1 / Enolase 1 / alpha-enolase 蛋白 (His 標(biāo)簽)

PDPN重組小鼠 Podoplanin / PDPN 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

AHSG Protein Mouse 重組小鼠 Fetuin-A / AHSG 蛋白 (His 標(biāo)簽)

PTPRA重組人 PTPRA / PTPalpha 蛋白 (aa 174-793, His & GST 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準(zhǔn)備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點(diǎn)燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動(dòng)一次，如用電磁恒溫?cái)嚢杵飨谩Ｏ瘯r(shí)間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時(shí)，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計(jì)數(shù)：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過大，再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細(xì)胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時(shí)需要換新塞。