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原代細(xì)胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進(jìn)行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間，以維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行，以促進(jìn)細(xì)胞生長。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當(dāng)營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無菌操作?：整個培養(yǎng)過程需要在無菌條件下進(jìn)行，以防止污染。

本產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用! 不能用于臨床或動物診斷！

細(xì)胞簡介：

小鼠上皮分離自組織；是機(jī)體重要的淋巴器官，其功能與免疫緊密相關(guān)，是T細(xì)胞分化、發(fā)育、成熟的場所，還可以分泌激素及激素類物質(zhì)，具有內(nèi)分泌技能的器官。上皮細(xì)胞和細(xì)胞是微環(huán)境的重要組成部分，其外，上皮細(xì)胞組成了細(xì)胞不同發(fā)育階段的三維結(jié)構(gòu)，根據(jù)其在中位置不同，可分為皮質(zhì)上皮細(xì)胞和髓質(zhì)上皮細(xì)胞。細(xì)胞的發(fā)育和成熟是通過在皮質(zhì)和髓質(zhì)上皮細(xì)胞的遷移過程中相互作用完成的。此外，細(xì)胞通過皮質(zhì)上皮細(xì)胞介導(dǎo)的陽性選擇和髓質(zhì)上皮細(xì)胞介導(dǎo)的陰性選擇發(fā)育為能夠識別和耐受自身主要組織相容復(fù)合體和自身抗原的成熟T淋巴細(xì)胞。上皮細(xì)胞是構(gòu)成微環(huán)境的主要成份，其形態(tài)、分布和功能多樣。表面抗原表達(dá)具有高度異質(zhì)性，與細(xì)胞結(jié)合成不同類型復(fù)合體，部分上皮細(xì)胞相互排列構(gòu)成囊泡樣結(jié)構(gòu)。電鏡觀察，可把上皮細(xì)胞分為3-6型，用抗上皮細(xì)胞單克隆抗體熒光染色可把上皮細(xì)胞分為9種類型。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個細(xì)胞。

?細(xì)胞計(jì)數(shù)?：使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器或其他方法對細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長狀態(tài)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠降鈣素原(PCT)ELISA 試劑盒 96T/48T

People mumps virus IgG ELISA Kit 人腮腺炎病毒IgG ELISA試劑盒

HumanmembraneIgD,mIgDELISAKit 人表面膜免疫球蛋白D(mIgD)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-cytomegalovirusIgMaibody,ai-CMVIgMELISA試劑盒人抗巨細(xì)胞病毒抗體IgM(ai-CMVIgM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物基因組DNA化試劑盒(高多糖/酚)50次

Humanα1-Acidglycoprotein,α1-AGPELISAKit人內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠催產(chǎn)素(OT)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠Ⅰ型膠原N末端肽(X)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠5核苷酸酶(5-)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

大鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒 ，英文名： IFN-β/IFNB ELISA Kit

Mouse leinizing hormone (LH) ELISA Kit 小鼠促黃體激素(LH)ELISA試劑盒

ELISA 小鼠(mouse NO) 48T/96T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforIL-11(HumanIerleukin11)ELISAKIT人白介素11規(guī)格：48T/96T

通用型馬皰疹病毒(EquineHerpesVirusType1)試劑盒20次

ELISAKitVEGFR-2大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體2規(guī)格：48T/96T

SELE重組小鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 蛋白 Protein

肌球蛋白輕鏈激酶(MYLK)重組蛋白 Recombinant Myosin Light Chain Kinase (MYLK)

APP重組人 Beta-amyloid 38 / Beta-APP38 蛋白 (aa 672-709, His & GST 標(biāo)簽) Protein

EIF4EBP1 Protein Human 重組人 4E-BP1 / EIF4EBP1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

TNFRSF9 Protein Canine 重組狗 CD137 / 4-1BB / TNFRSF9 蛋白 (His 標(biāo)簽)

小鼠胸腺上皮細(xì)胞肌球蛋白輕鏈激酶(MYLK)重組蛋白 Recombinant Myosin Light Chain Kinase (MYLK)

EIF4EBP1 Protein Human 重組人 4E-BP1 / EIF4EBP1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

SELE重組小鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 蛋白 Protein

TNFRSF9 Protein Canine 重組狗 CD137 / 4-1BB / TNFRSF9 蛋白 (His 標(biāo)簽)

APP重組人 Beta-amyloid 38 / Beta-APP38 蛋白 (aa 672-709, His & GST 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用