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原代細(xì)胞VS細(xì)胞系：

用酶或機(jī)械方法直接從人或動(dòng)物組織中分離出來的細(xì)胞。嚴(yán)格來說，從機(jī)體分離出來到傳代之前的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞，絕大部分的原代細(xì)胞在體外可以分裂10-15次(這與細(xì)胞的端粒長(zhǎng)短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會(huì)把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞。

?小鼠神經(jīng)干細(xì)胞

商品屬性：

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

小鼠神經(jīng)干分離自腦皮層組織；大腦分左右兩個(gè)半球，大腦皮質(zhì)（灰質(zhì)）覆蓋著每個(gè)大腦半球的大部分，它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每一個(gè)半球都有三個(gè)面，即外側(cè)面（約占整個(gè)皮質(zhì)面積的1/3）、內(nèi)側(cè)面和底面（占2/3的面積）；半球表面有很多深淺不等的溝或裂，溝或裂之間的隆起叫回，它們大大增加了大腦的表面積；大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔，使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。神經(jīng)干細(xì)胞具有分化為神經(jīng)神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞的能力，能自我更新，并足以提供大量腦組織細(xì)胞的細(xì)胞群。神經(jīng)干細(xì)胞是一類具有分裂潛能和自更新能力的母細(xì)胞，它可以通過不對(duì)等的分裂方式產(chǎn)生神經(jīng)組織的各類細(xì)胞。需要強(qiáng)調(diào)的是，在腦脊髓等所有神經(jīng)組織中，不同的神經(jīng)干細(xì)胞類型產(chǎn)生的子代細(xì)胞種類不同，分布也不同。神經(jīng)干細(xì)胞作為干細(xì)胞的一種，它具有其它所有干細(xì)胞的基本特征：具有自我維持和自我更新能力，具有多種分化潛能，具有分化為本系統(tǒng)大部分類型細(xì)胞的能力，這種自我更新和分化潛能可以維持相當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間甚至終生，對(duì)損傷和疾病具有反應(yīng)能力。神經(jīng)干細(xì)胞在疾病、損傷狀態(tài)下具有增殖、遷移，并向神經(jīng)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞分化的能力，已成為神經(jīng)系統(tǒng)損傷修復(fù)和再生研究的熱點(diǎn)，體外建立穩(wěn)定的神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)模型是其基礎(chǔ)和臨床應(yīng)用的前提。神經(jīng)干細(xì)胞在培養(yǎng)3-4d后，可形成神經(jīng)球，神經(jīng)球在培養(yǎng)基中呈懸浮生長(zhǎng)，予以更換半量培基，1周后用吸管輕柔吹打球形克隆成為小的神經(jīng)球和單細(xì)胞懸液，將部分細(xì)胞接種到新的培養(yǎng)瓶中，2×105個(gè)細(xì)胞/瓶，每7-10d傳代1次，每隔3d離心更換半量培養(yǎng)基1次，培養(yǎng)條件不變。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠神經(jīng)干經(jīng)Nestin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠神經(jīng)干采用消化后差速貼壁，結(jié)合神經(jīng)干細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 懸浮

細(xì)胞形態(tài) 球形

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%，Accutase

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞一般傳至10代左右，大部分細(xì)胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過“危機(jī)"而繼續(xù)傳下去，存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代，叫細(xì)胞株。當(dāng)50代以后又會(huì)出現(xiàn)“危機(jī)"，這時(shí)有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn)，從而可能無(wú)限制地傳代下去，稱為細(xì)胞系。

也有認(rèn)為細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長(zhǎng)期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。由此便引申出了后來的有限細(xì)胞系、無(wú)限細(xì)胞系，因此，細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞，廣義是指可傳代的細(xì)胞。而細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的單一細(xì)胞稱為細(xì)胞株。

細(xì)胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價(jià)格便宜、無(wú)限傳代等優(yōu)點(diǎn)，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯(cuò)誤鑒定及交叉污染的問題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

小鼠抗(AT)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat ai monocyte aibody (AMA) ELISA Kit 大鼠抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISA試劑盒

HumanfibrinopeptideB,FPBELISAKit 人血纖肽/纖維蛋白肽B(FPB)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanAmebiasisELISA試劑盒人阿米巴(Amebiasis)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物單酚氧化酶(monophenolase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

MonkeyIerleukin2,IL-2ELISAKit猴白介素2(IL-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠過敏毒素/補(bǔ)體片斷4a(C4a)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠胱天蛋白酶8(Casp-8)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠接觸蛋白4(CN4)ELISA試劑盒 ，英文名： CN4 ELISA Kit

Mouse neuophil elastase (NE) ELISA Kit 小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)ELISA試劑盒

RatplateletmembraneglycoproteinⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢaELISAKit 大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforFishi-iodothyronine,T3ELISAKit魚類三甲狀腺原規(guī)格：48T/96T

細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-1)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次

RatovalbuminspecificIgE,OVAsIgEELISAKit大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

ERBB2重組恒河猴 HER2 / ErbB2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

P19ARF p19ARF抑癌基因抗原 0.5mgP19ARF p19ARF抑癌基因抗原

CA8重組人 Carbonic Anhydrase VIII / CA8 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

DNASE1 Protein Human 重組人 DNASE1 / Deoxyribonuclease I / DNL1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

IFNA5 Protein Mouse 重組小鼠 IFNA5 / IFNaG 蛋白 (His 標(biāo)簽)

小鼠神經(jīng)干細(xì)胞P19ARF p19ARF抑癌基因抗原 0.5mgP19ARF p19ARF抑癌基因抗原

DNASE1 Protein Human 重組人 DNASE1 / Deoxyribonuclease I / DNL1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

ERBB2重組恒河猴 HER2 / ErbB2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

IFNA5 Protein Mouse 重組小鼠 IFNA5 / IFNaG 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CA8重組人 Carbonic Anhydrase VIII / CA8 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準(zhǔn)備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺(tái)面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點(diǎn)燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動(dòng)一次，如用電磁恒溫?cái)嚢杵飨谩Ｏ瘯r(shí)間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時(shí)，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計(jì)數(shù)：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過大，再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時(shí)需要換新塞。