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原代細胞VS細胞系：

用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細胞。嚴格來說，從機體分離出來到傳代之前的細胞稱為原代細胞，絕大部分的原代細胞在體外可以分裂10-15次(這與細胞的端粒長短有關)，再加上取材，成本等因素，通常會把培養的第一代到第十代以內的細胞統稱為原代細胞。

?小鼠破骨細胞

商品屬性：

細胞簡介：

小鼠破骨分離自骨組織和骨髓；破骨細胞是骨組織中的多核巨細胞，位于骨組織表面的淺凹處。目前一般認為破骨細胞是分離自骨骼外的造血系統，其前體可能屬于造血干細胞的前單核細胞。破骨細胞的主要功能是維持骨吸收和骨形成的相對平衡，若失去這種平衡則發生病理性變化。因此多數學者從破骨細胞著手研究破骨細胞的結構、功能探討骨吸收，形成相互平衡的機制。但破骨細胞是一種終末分化細胞，屬于不增殖細胞群，不能增殖和傳代，只能進行原代培養且存活時間較短。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠破骨經TRAP染色檢測，純度可達30%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠破骨采用機械分離法/密度梯度離心法和骨髓單核細胞誘導法制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 多核巨細胞

傳代特性 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細胞一般傳至10代左右，大部分細胞衰老死亡，但是有極少數的細胞能夠度過“危機"而繼續傳下去，存活的細胞一般能夠傳到40-50代，叫細胞株。當50代以后又會出現“危機"，這時有部分細胞的遺傳物質發生了改變且帶有癌變的特點，從而可能無限制地傳代下去，稱為細胞系。

也有認為細胞系指原代細胞培養物經傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續傳代的培養細胞。由此便引申出了后來的有限細胞系、無限細胞系，因此，細胞系狹義的是指可連續傳代的細胞，廣義是指可傳代的細胞。而細胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物的單一細胞稱為細胞株。

細胞系具有容易培養、種類多、價格便宜、無限傳代等優點，也非常容易在培養、凍存中發生錯誤鑒定及交叉污染的問題。

公司正在銷售的產品：

小鼠可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human hydroxyproline (Hyp) ELISA Kit 人羥脯(Hyp)ELISA試劑盒

Humanai-thymocyteglobulin,ATGELISAKit 人抗細胞球蛋白(ATG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanAgrinELISA試劑盒人聚集蛋白(Agrin)ELISA試劑盒規格：96T/48T

植物N-乙酰轉移酶(NAT)活性比色法定量檢測試劑盒20次

MouseADisiegrinAndMetalloprotease8,ADAM8ELISAKit小鼠解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA試劑盒規格：96T/48T

小鼠基質金屬蛋白酶-1(mouse MMP-1)   作用：   ELISA   規格：   48T/96   進口分裝

小鼠基質金屬蛋白酶-2(mouse MMP-2)   作用：   ELISA   規格：   48T/96   進口分裝

小鼠基質金屬蛋白酶-3(mouse MMP-3)   作用：   ELISA   規格：   48T/96   進口分裝

小鼠基質金屬蛋白酶-9(mouse MMP-9)   作用：   ELISA   規格：   48T/96   進口分裝

大鼠α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)ELISA試劑盒 ，英文名： α-SMA ELISA Kit

Mouse oxytocin (OT) ELISA Kit 小鼠催產素(OT)ELISA試劑盒

ELISA 小鼠血小板源生長因子-BB(mouse PDGF-BB) 48T/96 進口分裝

CLIAKitforIgMELISAKit大鼠免疫球蛋白M規格：48T/96

通用型牛布氏桿菌(Brucellaabous)試劑盒20次

大鼠心肌轉錄因子GATA4ELISAKit大鼠心肌轉錄因子GATA4ELISAKit，48T/96大鼠心肌轉錄因子GATA4ELISAKit，48T/96規格：48T/96

ICOS重組大鼠 ICOS / AILIM / CD278 蛋白 (Fc 標簽) Protein

ED-1 (Ectodermal Dysplasia 1 0.5mgED-1 (Ectodermal Dysplasia 1) 外胚層發育不良抗原

HDAC3重組人 HDAC3 / Histone deacetylase 3 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

DCX Protein Human 重組人 DCX 蛋白 (aa 45-150, GST 標簽)

JAM3 Protein Mouse 重組小鼠 JAM3 / JAM-C 蛋白 (His 標簽)

小鼠破骨細胞ED-1 (Ectodermal Dysplasia 1 0.5mgED-1 (Ectodermal Dysplasia 1) 外胚層發育不良抗原

DCX Protein Human 重組人 DCX 蛋白 (aa 45-150, GST 標簽)

ICOS重組大鼠 ICOS / AILIM / CD278 蛋白 (Fc 標簽) Protein

JAM3 Protein Mouse 重組小鼠 JAM3 / JAM-C 蛋白 (His 標簽)

HDAC3重組人 HDAC3 / Histone deacetylase 3 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

原代細胞培養的具體步驟：

1、準備：取各種已消毒的培養用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細胞團或單個細胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養液。

7、計數：用計數板計數，如細胞懸液細胞密度過大，再補加培養液調整后，分裝入培養瓶中。對大多數細胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調整。

8、培養：置于37℃溫箱培養，如用CO2溫箱培養，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時需要換新塞。